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一种PPAR活性污染物的生物检测方法
| 专利名称： | 一种PPAR活性污染物的生物检测方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种基于纳米金银染增强技术的PPAR活性污染物生物学检测方法，它是 将PFOS与含有PPAR受体和RXR受体蛋白的SD大鼠肝细胞核提取物孵育，激活PPAR受体， 形成PFOS-PPAR-RXR复合物，并暴露出与纳米金标记的双链PPRE探针结合位点，形成 PFOS-PPAR-RXR-PPRE复合物，在RXR单克隆抗体的特异性捕获下，该复合物被固定于酶标 板上，洗涤去除酶标板中的游离探针后，用银染增强液处理，在490nm波长处检测溶液的 OD值，根据PFOS标准品浓度与OD值之间的关系，绘制剂量-效应关系曲线，由此标准曲线 计算得出待测样本中PPAR活性污染物的量，具有灵敏度高，检测费用低，快速简便，适于 基层单位推广等特点。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 湖北;42 |
| 申请人： | 华中科技大学 |
| 发明人： | 徐顺清;万延建;刘 玮;李媛媛 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2008-04-10T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200810047288.2 |
| 公开号： | CN101556281 |
| 代理机构： | 北京市德权律师事务所 |
| 代理人： | 王建国 |
| 分类号： | G01N33/567(2006.01)I |
| 申请人地址： | 430074湖北省武汉市洪山区珞瑜路1037号 |
| 主权项： | 1.一种PPAR活性污染物的生物检测方法，包括以下步骤： (1)以动物肝脏组织制备的含过氧化物酶体增生物激活受体PPAR和共激活维甲酸X 受体Ratinoic acid X receptor，RXR的细胞核提取液作为PPAR活性污染物的激活靶受体； (2)用纳米金通过共价键合作用结合巯基修饰的PPRE探针上，该探针的核心序列为 AGGTAA； (3)将含PPAR和RXR的细胞核提取物与含PPAR活性污染物化合物的待测样本共同孵 育形成PPAR活性污染物PFOS-PPAR-RXR复合物； (4)抗RXR或PPAR抗体包被在酶标孔板上，通过抗原抗体反应，将激活的PPAR/RXR 复合物固定于该载体上； (5)将载体上所形成的PFOS-PPAR-RXR复合物与含有编码为AGGTAA序列的纳米金标 记PPRE探针共同孵育，使之相结合； (6)利用银染增强技术使因复合物结合而保留下的探针的纳米金标记信号得以放大， 并实时读取吸光度值，根据保留下的纳米金标记探针的量与诱导激活该复合物的PPAR活性 污染物的量成正比例关系的特点，采用全氟辛烷磺酸PFOS制定标准曲线，从而计算得出待 测样本中PFOS当量值。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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