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原文传递一种用于儿童个性化教育和健康指导的基因检测方法

专利名称：	一种用于儿童个性化教育和健康指导的基因检测方法
摘要：	本发明涉及一种用于儿童个性化教育和健康指导的基因检测方法。根据最新的分子生物学领域科学研究成果，选择了41个可用于儿童个性化教育指导的基因多态现象(位点)，利用微测序技术进行引物、探针设计以及实验验证。这些检测结果可以结合儿童的性别、年龄等特性以及相关环境因素(家庭背景、教育背景等)进行综合评估，为儿童个性化教育和培养提供指导意见。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海中优医药高科技有限公司;中国优生优育基因科学专家指导中心
发明人：	王校;张奕;毛丹丹
专利状态：	有效
申请日期：	2009-03-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN200910047750.3
公开号：	CN101560555
代理机构：	上海申汇专利代理有限公司
代理人：	翁若莹
分类号：	C12Q1/68(2006.01)I
申请人地址：	200433上海市杨浦区国泰路11号701室
主权项：	1.一种用于儿童个性化教育和健康指导的基因检测方法，其特征在于：步骤1.检测的样品类型与采样方法：用采样拭在20-30被测者口腔中分别左右两腮至少需要各上下刮40次以上，以保证采集到足量的细胞样本；步骤2.基因组DNA的抽提方法：采用硅胶吸附法抽提每一个口腔上皮细胞样本的基因组DNA，时间为2小时-2.5小时，共抽提20-30个被测者样本，经电泳检测后，用肉眼可见清晰白色条带即可判断获得的DNA能进入下一步检测；步骤3：荧光定量PCR反应：将每一个被测者样本分别放入41个反应孔，同时检测 41个位点，即血管紧张素转化酶(ACE)SEQ ID NO1：283bp I/D；α-辅肌动蛋白3(ACTN3) SEQ ID NO2：Arg577Ter；α2A肾上腺素受体(ADRA2A)SEQ ID NO3：C-1291G；β2 肾上腺素能受体(ADRB2)SEQ ID NO4：Arg15Gly；δ氨基-γ酮戊酸脱氢酶(ALAD)SEQ ID NO5：Asn68Lys；乙醛脱氢酶2(ALDH2)SEQ ID NO6：Lys504Glu；锚蛋白重复激酶结构域1(ANKK1)SEQ ID NO7：TaqI；载脂蛋白E(APOE)SEQ ID NO8：Cys112Arg；脑神经营养因子(BDNF)SEQ ID NO9：Val66Met；过氧化氢酶(CAT)SEQ ID NO 10： G-844A；捷状神经营养因子(CNTF)SEQ ID NO 11：G1275A；儿茶酚-氧位-甲基转移酶 (COMT)SEQ ID NO 12：Val158Met；C-反应蛋白(CRP)SEQ ID NO 13：G219A；细胞色素P450 1A2(CYP1A2)SEQ ID NO 14：C-729T；细胞色素P4501A2(CYP1A2)SEQ ID NO 15：G-3858A；多巴胺β羟化酶(DBH)SEQ ID NO 16：C-1021T；多巴胺β羟化酶(DBH)SEQ IDNO 17：G444A；多巴胺受体D3(DRD3)SEQ ID NO 18：Ser9Gly； G蛋白偶联受体54(GPR54)SEQ ID NO 19；谷胱甘肽硫转移酶P1(GSTP1)SEQ ID NO 20：Val105Ile；5-羟色胺受体1B(HTR1B)SEQ ID NO 21：A-161T；白介素1B(IL1B) SEQ ID NO 22：C-511T；IL1RAPL1 SEQ ID NO 23；白介素6(IL6)SEQ ID NO 24： G-174C；基质γ-羧基谷氨酸蛋白(MGP)SEQ ID NO 25：T-138C；亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)SEQ ID NO 26：C677T；亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)SEQ ID NO 27： A1298C；甲硫氨酸合酶(MTR)SEQ ID NO 28：Gly919Asp；甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR) SEQ ID NO 29：Met22Ile；内皮一氧化氮合成酶3(NOS3)SEQ ID NO 30：Glu298Asp； 8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)SEQ ID NO 31：Ser326Cys；μ阿片受体(OPRM1) SEQ ID NO 32：A118G；PAX6 SEQ ID NO 33：IVS9-12C/T；I型二乙基对氧磷酸酯酶 (PON1) SEQ ID NO 34：Arg192Gln；SLC6A3 SEQ ID NO 35：MspI；TNFRSF11B SEQ ID NO 36：A163G；色胺酸羟化酶1(TPH1)SEQ ID NO 37：A218C；维生素D受体(VDR) SEQ ID NO 38：BsmI；维生素D受体(VDR)SEQ ID NO 39：Fok I；维生素D受体(VDR) SEQ ID NO 40：Ile352Ile；WWC1 SEQ ID NO 41；20-30个被测者样本就有820-1230个反应孔，另外根据实验需要增设不含DNA模版的NTC空白对照孔；每一个反应孔的基因分型可以根据下表的引物和探针设计，采用 id="icf0001" file="A2009100477500003C1.tif" wi="23" he="3" top= "62" left = "151" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>技术，进行检测试剂合成；在每一个反应孔中加入试剂为荧光定量PCR反应体系，总体积为10μl，即浓度为 20ng/μl的DNA模板2μl、1μl 10X荧光定量PCR反应缓冲液ABI id="icf0002" file="A2009100477500003C2.tif" wi="16" he="3" top= "86" left = "142" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>MGB、0.1μl 25mM d NTP合成DNA的四种脱氧核苷酸底物、0.5μl 25mM MgCl2溶液、O.02μl(5units/μl)Taq DNA聚合酶、去离子水4.98μl、41个位点分别采用不同的正向引物(20μM，0.225μl)、反向引物(20μM，0.225μl)、VIC荧光探针(10μM，0.25μl)和FAM荧光探针(10μM，0.25μl) 工具进行检测(详见下表)；
所属类别：	发明专利