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利用快速蛋白质液相色谱测定木瓜蛋白酶纯度的方法
| 专利名称： | 利用快速蛋白质液相色谱测定木瓜蛋白酶纯度的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种利用快速蛋白质液相色谱测定木瓜蛋白酶纯度的方法，包括：配制流 动相A溶液：乙酸-乙酸钠缓冲溶液和流动相B溶液：乙酸-乙酸钠-氯化钠缓冲溶液；分别 将精制的木瓜蛋白酶和粗制的木瓜蛋白酶置入50ml容量瓶内，加入流动相A溶液至50ml 刻度线定容，摇匀，至木瓜蛋白酶充分溶解；最后利用快速蛋白质液相色谱FPLC的离子 交换色谱柱进行层析分离，通过计算峰面积比值的公式来计算木瓜蛋白酶的纯度。该测定 方法快速、操作简单，耗时少，结果可信，重复性高，为精确测定木瓜蛋白酶的纯度提供 依据，具有重要的学术价值和实际应用意义。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 上海;31 |
| 申请人： | 东华大学 |
| 发明人： | 朱利民;苏赛男;聂华丽 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-06-09T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910052722.0 |
| 公开号： | CN101565739 |
| 代理机构： | 上海泰能知识产权代理事务所 |
| 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 分类号： | C12Q1/37(2006.01)I |
| 申请人地址： | 201620上海市松江区松江新城区人民北路2999号 |
| 主权项： | 1.一种利用快速蛋白质液相色谱测定木瓜蛋白酶纯度的方法，包括： (1)配制流动相 流动相A溶液：0.02～0.1mol/L pH4.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液； 流动相B溶液：含1.0～2.0mol/L氯化钠的0.02～0.1mol/LpH4.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液； (2)制备对照品溶液 将木瓜蛋白酶置入50ml容量瓶内，加入流动相A溶液至50ml刻度线定容，摇匀，至 木瓜蛋白酶充分溶解，制得木瓜蛋白酶对照品溶液； (3)制备供试样品溶液 将粗制木瓜粉置于50ml容量瓶中，加入流动相A溶液至50ml刻度线定容，摇匀，经滤 纸过滤，备用； (4)利用快速蛋白质液相色谱FPLC的离子交换色谱柱进行层析分离，通过计算峰面积比 值的公式来计算木瓜蛋白酶的纯度。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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