主权项: |
1、一种止血能力的检测方法,其特征在于,步骤如下:
1)静脉血液与0.13mol/L拘橼酸钠的抗凝剂按体积9∶1比例制备抗凝血;
2)以3000r/min离心抗凝血血样15分钟,吸取血浆待检;
3)总体止血能力OHP测定:
调节光度仪波长为340nm,设置测试时间30min,以缓冲液调节测试零
点,预先在比色皿中加入待检血浆100μl,随后加入900μl反应缓冲液,反应
缓冲液是0.1mmol/L Tris、PEG-6000 5-30g/L、Tween-80 10g/L、CaCl2
5mmol/L,组织因子TF浓度从0-1/200000,UK浓度从10U-200U/ml,其余
是水,pH 7.35,立即混匀,然后置于光度仪测试孔内,监测和记录纤维蛋白
形成和降解过程的吸光度变化,将每分钟吸光度值相加,共30分钟,即反应
曲线内的面积,此值为总体止血能力OHP;
4)总体凝血能力OCP测定:
采用与上述OHP测试相同的反应体系、实验条件和操作方法,但反应缓
冲液是0.1mmol/L Tris、PEG-6000 5-30g/L、Tween-80 10g/L、CaCl2 5mmol/L,
组织因子TF浓度从0-1/200000,其余是水,pH 7.35,立即混匀,然后置于
光度仪测试孔内,监测30min内纤维蛋白形成过程的吸光度的变化,将每分
钟吸光度值相加,共30分钟,即反应曲线内的面积,此值为总体凝血能力
OCP;
5)总体纤溶能力OFP判断:
按下列公式计算:OFP=〔(OCP-OHP)/OCP〕×100%;
正常血浆OCP参考值为4.84±1.40、OHP为2.37±0.91,当OCP、OHP
小于正常参考值下限,提示存在凝血障碍;当大于正常参考值上限,提示存
在高凝状态,当OFP值小于41.61%,提示纤维蛋白溶解功能降低。 |