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检测乙肝感染相关基因STR位点的方法、试剂盒及应用
| 专利名称： | 检测乙肝感染相关基因STR位点的方法、试剂盒及应用 |
| 摘要： | 本发明公开了一种检测与乙肝病毒感染相关的IL-10基因两个STR位点的基因型的方法、 试剂盒及应用。所述方法为STRs-PCR，包括模板DNA的制备，两个STR位点的引物设计，PCR 扩增体系的组配，PCR循环反应，毛细管电泳及荧光检测并分析PCR产物。与现有技术相比， 本发明将IL-10基因两个STR位点与乙肝病毒感染的易感性联系起来，确定了IL-10.G、 IL-10.R是乙肝病毒感染的新型相关基因；并采用STRs-PCR方法，通过对IL-10基因IL-10.G 和IL-10.R两个STR位点的基因型进行检测，从而可判断个体对乙肝病毒的易感性，为乙肝病 毒感染的人群预防和控制提供了新的遗传咨询内容。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 贵州;52 |
| 申请人： | 贵阳医学院 |
| 发明人： | 单可人;王婵娟;何 燕 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-06-25T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910303684.1 |
| 公开号： | CN101597651 |
| 代理机构： | 贵阳中新专利商标事务所 |
| 代理人： | 刘 楠;程新敏 |
| 分类号： | C12Q1/68(2006.01)I |
| 申请人地址： | 550004贵州省贵阳市北京路4号 |
| 主权项： | 1.一种检测与乙肝病毒感染相关的IL-10基因两个STR位点的基因型 的方法，所述方法为STRs-PCR，即短串联重复序列或微卫星DNA聚合酶链式反应，其特征在 于：包括以下步骤： (1)采取血样，红细胞悬液经过酚-氯仿抽提基因组DNA后，用TE缓冲液溶解制备模板 DNA； (2)IL-10.G与IL-10.R两个STR位点的引物设计：IL-10.R微卫星PCR扩增的引物序列为 ：5′-CCCTCCAAAATCTATTTGCATAAG-3′、5′-CTCCGCCCAGTAAGTTTCATCAC-3′；IL-10.G微卫 星PCR扩增的引物序列为：5′-TTCCTCCCAGTTACAGTCT-3′、5′-CACCATCTCCAGCACATA-3′； (3)PCR扩增体系的组配：10×PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、上游引物G/R、下游引物G/R 、Taq DNA聚合酶、模板DNA和去离子水； (4)混匀反应体系，瞬时离心后上机，进行PCR循环反应； (5)ABI310测序仪自动荧光检测并分析PCR产物：向PCR产物中加入去离子甲酰胺进行变 性，然后置于ABI 310测序仪中进行毛细管电泳及荧光检测，再用GeneScan软件对产物片段 进行准确测定，后利用产物片段大小的数值进行基因分型。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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