原文传递
一种含绿色荧光蛋白融合标签的重组蛋白定量检测方法
| 专利名称： | 一种含绿色荧光蛋白融合标签的重组蛋白定量检测方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种绿色荧光蛋白或含该蛋白的融合蛋白的定量检测方法，它利用在制备抗绿色荧光蛋白多克隆抗体和单克隆抗体的基础上，经过配对抗体的筛选，建立的双抗体夹心酶联免疫吸附试验，来定量检测绿色荧光蛋白。其特征是在96孔板中，顺序加入单克隆抗包被抗体、待测标本和标准品、多克隆检测抗体、酶标抗体及底物，于波长410nm测定光吸收值。本发明克服了免疫印迹法的不足，不仅可以定量检测，而且特异性强、灵敏度高、重复性好、简便易行，非常适合于快速定量检测绿色荧光蛋白及相应的融合白。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 陕西;61 |
| 申请人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 发明人： | 金伯泉;庄然;李琦;徐竹蔚;宋朝君 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2010-09-10T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201010278513.0 |
| 公开号： | CN101963619A |
| 代理机构： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 |
| 代理人： | 朱海临 |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01)I |
| 申请人地址： | 710032 陕西省西安市长乐西路17号 |
| 主权项： | 一种含绿色荧光蛋白融合标签的重组蛋白定量检测方法，其特征在于，包括下述步骤：(1)用5mg/L包被抗体包被96孔板，4℃下放置过夜；(2)用含牛血清白蛋白的缓冲液室温封闭96孔板，洗涤后弃去封闭液；(3)在一部分孔中加入倍比稀释的绿色荧光蛋白标准品，剩余孔中加入待测标本，孵育及洗涤后加入检测抗体，再孵育及洗涤后加入酶标抗体，(4)第三次孵育及洗涤后以2，2’ 连氮基 双(3 乙基苯并噻吡咯啉 磺酸)作为底物显色，于波长410nm测定光吸收值；(5)以标准品的光吸收值为纵坐标，相应浓度为横坐标，作标准曲线，根据待测标本的光吸收值，经曲线拟合计算，得出待测标本中绿色荧光蛋白的浓度。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
