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冻干型血小板抗原谱细胞的制备方法
| 专利名称： | 冻干型血小板抗原谱细胞的制备方法 |
| 摘要： | 一种冻干型血小板抗原谱细胞的制备方法，属于生物技术领域。本发明的目的是为了解决临床缺乏血小板抗原谱细胞，易出现抗体漏检和不能确定抗体特异性的问题，组建HPA-1~6，15基因分型的血小板抗原谱细胞系，可广泛应用于血小板抗体的检测和特异性鉴定的冻干型血小板抗原谱细胞的制备方法。本发明步骤是：a、血小板抗原HPA-1~6和HPA-15系统基因分型的检测；b、组建血小板抗原谱细胞系；c、血小板悬液的制备；d、负载；e、冷冻干燥。本发明关键在于检测O型献血员HPA-1~6,15基因分型，根据分型的结果建立血小板抗原谱。HPA基因分型的血小板抗原谱细胞，经冷冻干燥制备成抗原性稳定的冻干品，在血小板抗体检测时可确定抗体的特异性，同时解决了血小板抗原难以稳定保存的难题。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 吉林;22 |
| 申请人： | 李勇 |
| 发明人： | 段生宝;鞠海英;邰慧波;杨文冲;童军;孔维臣 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2010-09-19T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201010285608.5 |
| 公开号： | CN101957364A |
| 代理机构： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 |
| 代理人： | 白冬冬 |
| 分类号： | G01N33/531(2006.01)I |
| 申请人地址： | 130012 吉林省长春市高新开发区晨光街433号 |
| 主权项： | 一种冻干型血小板抗原谱细胞的制备方法，其特征在于：a、血小板抗原HPA1~6和HPA15系统基因分型的检测采集献血员EDTA抗凝全血，通过盐析法提取DNA，其纯度应在1.6以上；对献血员样本进行HPA1~6，15系统进行基因分型，扩增条件如下：95℃预变性5min后，95℃30s，60℃30s，72℃50s，30个循环，72℃延伸5min；b、组建血小板抗原谱细胞系血小板抗原谱细胞根据O型献血员的血小板抗原分型结果建立10组HPA1~6，15系统的抗原谱，其抗原分型见表1；c、血小板悬液的制备：采集筛选好的10名献血员新鲜EDTA抗凝全血，900rpm离心30min；取上层富血小板血浆，3000rpm离心30min；弃血浆，用冻干保护液充分悬浮压积血小板，并调节血小板浓度为100~150×109/L；d、负载：将血小板悬液置于37℃恒温箱中负载4h，期间每隔30min振荡混匀一次；e、冷冻干燥：将负载后的血小板悬液分装后，置于冻干机中进行冷冻干燥；其冻干条件见表2。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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