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原文传递 壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法
专利名称: 壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法
摘要: 本发明公开了一种壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法,其步骤是:A、配制羧甲基壳聚糖-CdTe量子点溶液:根据羧甲基壳聚糖-CdTe量子点的浓度,用移液管移取羧甲基壳聚糖-CdTe量子点溶液于灭菌的容量瓶中,加入高纯水定容;B、将T25细胞培养瓶中已长满的狗肾细胞用EDTA-胰蛋白酶消化为单细胞悬浮液,细胞计数后取狗肾细胞接种到到细胞培养皿中,加入营养液,培养;C、待狗肾细胞贴壁生长后,向培养皿中加入壳聚糖-量子点荧光探针,与狗肾细胞共同孵育,得到已标记上荧光的狗肾细胞。本发明操作简便,荧光效率高、生物相容性好、稳定时间长,荧光探针无细胞毒性,可用于细胞的长时间的观测。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 湖北;42
申请人: 武汉市疾病预防控制中心;武汉大学
发明人: 何振宇;周培疆;朱洪浩
专利状态: 有效
申请日期: 2010-10-20T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201010512868.1
公开号: CN101980005A
代理机构: 武汉宇晨专利事务所 42001
代理人: 王敏锋
分类号: G01N21/64(2006.01)I
申请人地址: 430022 湖北省武汉市江汉北路24号
主权项: 一种壳聚糖?量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法,其步骤是:A、配制0.0000025?0.001mol/L的羧甲基壳聚糖?CdTe量子点溶液:根据羧甲基壳聚糖?CdTe量子点的浓度,用移液管移取0.1~5ml的羧甲基壳聚糖?CdTe量子点溶液于灭菌的10ml容量瓶中,加入高纯水,电阻率大于?18?MΩ·cm,定容,备用;B、将T25细胞培养瓶中已长满的狗肾细胞用0.05%体积比的EDTA?胰蛋白酶消化为单细胞悬浮液,细胞计数后取1×104~1×107的狗肾细胞接种到到细胞培养皿中,加入含10%体积比的胎牛血清的DMEM营养液,在37℃、5%体积比的CO2细胞培养箱中培养,使细胞正常贴壁生长繁育,得到用于实施标记的狗肾细胞;C、待步骤(B)狗肾细胞贴壁生长12~36小时后,向培养皿中加入壳聚糖?量子点荧光探针,于37℃、5%体积比的CO2细胞培养箱中与细胞共同孵育6~48小时,得到带有荧光的狗肾细胞,弃去营养液,用pH=7.4磷酸盐缓冲溶液洗涤2次,用荧光显微镜观察标记情况。
所属类别: 发明专利
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