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原文传递 一种医用无菌无热源鱼皮胶原蛋白海绵的制备方法
专利名称: 一种医用无菌无热源鱼皮胶原蛋白海绵的制备方法
摘要: 本发明属于生物医用材料制备领域,特别涉及一种鱼皮胶原蛋白海绵的制备方法,经过前处理、酸溶、盐析、透析纯化、超滤膜浓缩、除菌、除热源和冻干得到医用无菌无热源鱼皮胶原蛋白海绵。本发明使用了成本低廉、且更加安全的鱼皮作为胶原蛋白海绵的来源,不需要经过交联的步骤就能得到高纯度、低灰分的医用胶原蛋白海绵。
专利类型: 发明专利
申请人: 上海华睿生物科技有限公司
发明人: 顾其胜;辛春华;王南平;王知华;金强
专利状态: 有效
申请日期: 2013-08-01T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201310333125.1
公开号: CN104338175A
代理机构: 上海精晟知识产权代理有限公司 31253
代理人: 冯子玲
分类号: A61L15/32(2006.01)I
申请人地址: 201506 上海市金山区金山工业区亭卫公路6725号7幢
主权项: 一种医用无菌无热源鱼皮胶原蛋白海绵的制备方法,其特征在于步骤如下:(1)去除鱼皮上的鱼肉及脂肪,用10?50倍鱼皮重量的清水清洗2次,将洗净的鱼皮剪碎成0.5~5cm2的小块;(2)用10?50倍鱼皮重量的1%~10%NaCl溶液搅拌下漂洗鱼皮32h~48h,每8h~12h更换一次NaCl溶液;(3)用10?50倍鱼皮重量的去离子水漂洗4次,每次0.5~1h;(4)用10?50倍鱼皮重量的0.1mol/L?NaOH溶液搅拌下漂洗32h~48h,每8h~12h换一次NaOH溶液;(5)用10?50倍鱼皮重量的去离子水漂洗4次,每次0.5~1h,至pH6~7;(6)将经前述步骤(1)~(5)处理后得到的鱼皮置于0.3~1.0mol/L的稀酸缓冲液中溶胀,搅拌4h~12h后离心,取上清液,得到鱼皮粗胶原提取液;(7)鱼皮粗胶原提取液经5μm滤膜过滤,加入饱和NaCl或(NH4)2SO4溶液盐析,蛋白析出;静置数小时后离心,得到胶原沉淀;(8)将胶原沉淀重新溶解于3?5倍鱼皮重量的纯水中,以5?20倍鱼皮重量的纯水为透析外液,半透膜截流分子量100KDa,对胶原蛋白进行透析纯化;(9)取纯化胶原液用30KD~50KD分子量的超滤膜浓缩,至胶液中蛋白浓度达到1%~4%;(10)浓缩后的胶液用0.22μm~0.45μm板式膜进行除菌,然后加入0.1%~5%(w/v)药用活性炭搅拌后过滤,以去除热源;(11)胶液置于?60℃低温冷冻干燥机冻干,得到胶原蛋白海绵。
所属类别: 发明专利
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