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原文传递 一种特定分子量透明质酸分离纯化的方法
专利名称: 一种特定分子量透明质酸分离纯化的方法
摘要: 本发明涉及一种特定分子量透明质酸的分离纯化方法,主要涉及半制备高效色谱法分离纯化,超滤离心管浓缩,冷冻干燥等工艺环节。本发明的有益效果主要为:采用本发明方法,可以收集到特定分子量的透明质酸,纯度较高,重复性强,操作简单,大大减少有机溶剂用量,绿色环保。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 浙江;33
申请人: 浙江工业大学
发明人: 赵航;马亚婷;张雷芳
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810213224.9
公开号: CN108872409A
代理机构: 杭州斯可睿专利事务所有限公司 33241
代理人: 王利强
分类号: G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06
申请人地址: 310014 浙江省杭州市下城区朝晖六区潮王路18号
主权项: 1.一种特定分子量透明质酸的分离纯化方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)原料准备:以分子量130kDa‑2000kDa的透明质酸为原料,配制成浓度为0.1~1mg/mL的透明质酸溶液,磁力搅拌16~20h,使透明质酸溶解;(2)流动相配制:配制0.05~0.5mol/mL的氯化钠溶液,0.45um的滤膜抽滤,超声波超声脱气10~15min;(3)分离纯化:半制备液相色谱仪进行分离纯化;色谱条件:选用凝胶色谱柱;示差折光检测器;流动相为0.05~0.5mol/mL的氯化钠溶液;流速为0.5~5ml/min;柱温为40℃;进样量为500~1500uL;检测时间为40min;(4)馏分收集:收集不同时间间隔的馏分;(5)馏分浓缩:使用超滤离心管,将不同时间间隔的馏分分别放入离心机中高速离心1~5min,转速为2000~6000rmp;(6)干燥:采用冷冻干燥法,分别获得不同分子量的透明质酸冻干粉;(7)分子量测定:高效液相凝胶色谱法测定其相对分子量;以聚苯乙烯磺酸钠盐为标准品,以保留时间为横坐标,以Mp峰位分子量为纵坐标,绘制标准曲线,GPC软件分析法得结果。
所属类别: 发明专利
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