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lncRNA MEG3双重检测电化学基因传感器，其制备方法与应用
| 专利名称： | lncRNA MEG3双重检测电化学基因传感器，其制备方法与应用 |
| 摘要： | 本发明涉及lncRNA MEG3双重检测电化学基因传感器，其制备方法与应用，基于酶辅助目标循环信号放大与DNA链杂交（HCR）信号增强策略，采用二硫化钨/树枝状金纳米复合材料修饰电极以及碱基特异性互补配对，通过双信号探针实现对双组分的超灵敏定量分析。本发明的电化学基因传感器检测双组分的线性范围为1fM~100pM，检测限低，分别为0.25fM和0.3fM；具有优异的灵敏度、重复性、特异性和稳定性，并且成本低，因而在生化研究和临床分析等领域具有较大的应用价值。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 南京工业大学 |
| 发明人： | 陈晓君;李小燕;黄和;彭钢;崔枫;仇倩颖 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810771953.6 |
| 公开号： | CN108896639A |
| 代理机构： | 江苏致邦律师事务所 32230 |
| 代理人： | 徐蓓;尹妍 |
| 分类号： | G01N27/327(2006.01)I;C12Q1/6825(2018.01)I;G;C;G01;C12;G01N;C12Q;G01N27;C12Q1;G01N27/327;C12Q1/6825 |
| 申请人地址： | 211816 江苏省南京市浦口区浦珠南路30号 |
| 主权项： | 1.一种lncRNAMEG3双重检测电化学基因传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)以金电极作为工作电极，取二硫化钨分散液滴于已经洁净处理过的金电极表面，采用电化学沉积的方式制备二硫化钨/树枝状金纳米复合材料的修饰金电极；(2)将巯基化的捕获探针混合物溶液滴于电极表面，再用巯基己醇封闭电极表面多余的活性位点，得到捕获探针修饰金电极；(3)制备磁性微球，将表面含羧基官能团的磁性微球与5’端氨基修饰的引物单链通过共价键结合，加入双重检测对象T1和T2温育后，添加核糖核酸酶RNaseA，在RNaseA作用后磁性分离，获取上清液，即得到酶辅助目标循环信号放大反应的中间探针；(4)将步骤(2)获取的捕获探针修饰金电极浸没在步骤(3)获取的上清液中混合孵育，再与辅助探针孵育后，将修饰金电极浸没在以二茂铁和亚甲基蓝作为信号分子的信号探针溶液中进行杂交链式反应，获得所述基因传感器。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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