专利名称: |
一种基于G‑四链体的DNA传感器对Pb2+浓度的测试方法 |
摘要: |
本发明属于DNA传感器技术领域,具体涉及一种基于G‑四链体的DNA传感器对Pb2+浓度的测试方法。本发明只通过“混合‑检测”步骤的检测Pb2+,具有非常好的灵敏度和选择性;G‑四链体DNA相比于金属离子辅助酶和RNA裂解脱氧核糖核酸酶来说更加稳定,不需要复杂的制备过程;相比于利用各种剪切酶的方案来说就更加的经济、便捷,而且作为荧光信号指示单元的PPIX很廉价并且具有非常有效的荧光特性,这些免标记的特点从根本上降低了检测的成本。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
河南;41 |
申请人: |
河南师范大学 |
发明人: |
王公轲;邵超伟;王双莉;李丹;闫长领;陈得军 |
专利状态: |
有效 |
发布日期: |
2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201711022555.6 |
公开号: |
CN107607513A |
代理机构: |
新乡市平原智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 41139 |
代理人: |
路宽 |
分类号: |
G01N21/64(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/64 |
申请人地址: |
453007 河南省新乡市牧野区建设东路46号 |
主权项: |
一种基于G‑四链体的DNA传感器对Pb2+浓度的测试方法,其特征在于包括以下步骤:①配制含有探针DNA的混合溶液,有探针DNA的混合溶液包括50mM pH 6.0的Tris‑HCl缓冲溶液,50mM KCl,10mM NaCl,0.5μM探针DNA,0~2000nM Pb2+;置于95℃的水浴中加热10分钟,之后冷却至室温;所述探针DNA的序列如SEQ ID NO:1 所示; ②向步骤①处理后不同Pb2+浓度下的含有探针DNA的混合溶液中加入等体积0.5μM的PPIX溶液,在暗处反应1h,最后用微量荧光比色皿在荧光光度计中测得其荧光光谱,激发波长设定为410nm,扫描范围为550nm‑750nm,测定在632nm处的荧光强度值;PPIX的结构式如下:;③绘出不同浓度Pb2+下荧光强度值的标准工作曲线; ④将配制的待测Pb2+浓度的含有探针DNA的混合溶液置于95℃的水浴中加热10分钟,之后冷却至室温,加入等体积0.5μM的PPIX溶液,在暗处反应1h,最后用微量荧光比色皿在荧光光度计中测得其荧光光谱,激发波长设定为410nm,扫描范围为550nm‑750nm,测定在632nm处的荧光强度值;根据步骤③的标准工作曲线,即可得出待测溶液的Pb2+浓度值。 |
所属类别: |
发明专利 |