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一种基于三链连环DNA的电化学生物传感器及制备方法
| 专利名称： | 一种基于三链连环DNA的电化学生物传感器及制备方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种基于三链连环DNA的电化学生物传感器及制备方法，设计了内环探针和外环探针，当两个探针互补时，形成DNA小环；在适当的pH条件下，小环之间通过Hoogsteen键和Watson‑Crick键进行自组装，形成连环核酸链；再通过捕获探针、连接探针的帮助，将连环DNA长链连接在金电极上，六氨合钌通过静电作用吸附在DNA骨架上，通过检测六氨合钌的电化学信号，实现对miRNA的检测。该生物传感器在1fM到10nM内对靶标miRNA‑21准确检测，检测限为1.63fM。该生物传感器可直接检测没有预处理血清样品中的miRNA；可用于检测其他生物标志物，在临床诊断及预后方面有很好的应用前景。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 福建;35 |
| 申请人： | 福州大学 |
| 发明人： | 陈宪;姚乐 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810561093.3 |
| 公开号： | CN108426932A |
| 代理机构： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 |
| 代理人： | 蔡学俊;饶文君 |
| 分类号： | G01N27/327(2006.01)I;G01N27/26(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N27;G01N27/327;G01N27/26 |
| 申请人地址： | 350108 福建省福州市闽侯县福州地区大学新区学园路2号 |
| 主权项： | 1.一种基于三链连环DNA的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于：包含以下步骤：（1）将直径为2mm的金电极用Al2O3抛光粉打磨，超纯水冲洗干净；（2）取10µL、1µM的捕获探针固定液滴加到电极表面，加盖，室温孵育180min，缓冲液冲洗电极表面，N2吹干；（3）取10µL、2mM的巯基己醇溶液滴加到步骤（2）所得电极表面，加盖，室温孵育90min，封闭电极表面的非特异性活性位点，缓冲液冲洗电极表面，N2吹干；（4）取10µL目标探针miRNA‑21的杂交缓冲液滴加在步骤（3）所得电极上，加盖，室温孵育60min，缓冲液冲洗电极表面，N2吹干；（5）取10µL、1µM的连接探针缓冲液滴加到步骤（4）所得电极表面，加盖，室温孵育60min，缓冲液冲洗电极表面，N2吹干；（6）取10µL各含2uM的内环探针与外环探针的杂交缓冲液滴加到步骤（5）所得电极表面，加盖，室温孵育60min，缓冲液冲洗电极表面，N2吹干；（7）将含有50µM六氨合钌的电化学检测液通N2，15min；（8）步骤（6）所得电极置于步骤（7）所得电化学检测液中，电化学工作站在‑0.6~0.2电势范围内用差分脉冲伏安法扫描。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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