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原文传递 土壤脲酶的测定方法
专利名称: 土壤脲酶的测定方法
摘要: 土壤脲酶的测定方法,该方法涉及一种脲酶的测定方法。本发明解决目前比色法测定土壤脲酶活性的测定效果不稳定、准确率较低的问题。测定方法:一、获得样品测量液;二、无土对照样、无基质对照样制备;三、获得初步NH3‑N浓度、无土对照样NH3‑N浓度和无基质对照样NH3‑N浓度;四、计算:以1g土壤中NH3‑N的质量表示脲酶活性:Ure=a·V·n/m。本发明测定土壤脲酶活性平行性好,变异系数小,方法可行性高、精确度高。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 黑龙江;23
申请人: 黑龙江大学
发明人: 焦晓光;周珂;徐欣;张锦源;隋跃宇;陈一民;王晓军
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810857007.3
公开号: CN108956594A
代理机构: 哈尔滨市文洋专利代理事务所(普通合伙) 23210
代理人: 何强
分类号: G01N21/78(2006.01)I;G01N21/31(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/78;G01N21/31
申请人地址: 150080 黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路74号
主权项: 1.土壤脲酶的测定方法,其特征在于该方法按以下步骤进行:一、取4.95g~5.05g风干土样品加1mL±2μL甲苯,15min后加10mL±2μL尿素溶液和20mL±2μL修正通用缓冲工作液摇匀,再在37℃±1℃恒温箱中培养23h~25h,获得样品测量液;二、无土对照样、无基质对照样制备:取4.95g~5.05g水加1mL±2μL甲苯,15min后加10mL±2μL尿素溶液和20mL±2μL修正通用缓冲工作液摇匀,再在37℃±1℃恒温箱中培养23h~25h,即得到无土对照样;取4.95g~5.05g风干土样品加1mL±2μL甲苯,15min后加10mL±2μL水和20mL±2μL修正通用缓冲工作液摇匀,再在37℃±1℃恒温箱中培养23h~25h,即得到无基质对照样;三、过滤步骤一样品测量液,取1mL±2μL滤液加蒸馏水至20mL,然后加入4mL±2μL苯酚钠溶液和3mL±2μL次氯酸钠溶液,边加边摇匀,20min~25min后显色,定容,1h内分光光度计波长578nm比色,测定吸光值再与氮溶液浓度标准曲线比较,获得初步NH3‑N浓度;过滤步骤二无土对照样和无基质对照样测量液,分别取1mL±2μL滤液加蒸馏水至20mL,然后加入4mL±2μL苯酚钠溶液和3mL±2μL次氯酸钠溶液,边加边摇匀,20min~25min后显色,定容,1h内分光光度计波长578nm比色,测定吸光值再与氮溶液浓度标准曲线比较,获得无土对照样NH3‑N浓度和无基质对照样NH3‑N浓度;四、计算以1g土壤中NH3‑N的质量表示脲酶活性:Ure=a·V·n/m其中:a为样品测量液NH3‑N浓度,样品测量液NH3‑N浓度=初步NH3‑N浓度‑无土对照样NH3‑N浓度‑无基质对照样NH3‑N浓度;V为显色液体积;n为样品测量液的分取倍数;m为烘干土重;其中,尿素溶液为24g~26g尿素溶于水中,并用蒸馏水定容至250mL制成;修正通用缓冲工作液是199~201mL修正通用缓冲储备液用0.1M HCl调节至pH6.0,然后用蒸馏水定容到1L制成;上述修正通用缓冲储备液是将12.0g~12.2g Tris、11.5g~11.7g顺丁烯二酸、13.9g~14.1g柠檬酸一水化合物和6.2g~6.4g硼酸溶于490mL~510mL 1M NaOH中,再用蒸馏水定容到1000mL制成。
所属类别: 发明专利
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