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原文传递一种利用蛋白芯片对囊胚质量判断的方法

专利名称：	一种利用蛋白芯片对囊胚质量判断的方法
摘要：	本发明公开了一种利用蛋白芯片对囊胚质量判断的方法，包括步骤：一、在胚胎发育到囊胚阶段时，将囊胚转移；二、将培养液滴吸取至样品管中，并在样品管中加入蛋白酶抑制剂后制成待测样品；三、将待测样品加入到384孔板中，并在每个孔中加入点样液后制成待点样样品；步骤四、将孔内的待点样样品点到芯片上，将芯片在湿盒中放置和烘箱中烘干；五、对烘干后的芯片进行蛋白抗体的孵育，制成蛋白芯片；六、对每张蛋白芯片进行荧光检测，并将得到的每个囊胚的六种蛋白质的含量分别与这六种蛋白质的标准含量进行比较。本发明能无创的、客观的、定量的评价囊胚发育情况，可用以筛选质量高、具备种植潜能的囊胚，帮助提高对囊胚质量筛选的准确性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	西北妇女儿童医院
发明人：	施文浩
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810552757.X
公开号：	CN108982867A
代理机构：	北京中济纬天专利代理有限公司 11429
代理人：	线飞祥
分类号：	G01N33/68(2006.01)I;G01N33/533(2006.01)I;G01N33/58(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/533;G01N33/58
申请人地址：	710061 陕西省西安市曲江新区雁翔路1616号
主权项：	1.一种利用蛋白芯片对囊胚质量判断的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将需要质量判断的胚胎放置在胚胎培养皿中进行胚胎培养，在胚胎发育到囊胚阶段即受精后第5～6天时，将囊胚转移到另一个胚胎培养皿的培养液滴中；步骤二、将步骤一中转移走囊胚后的胚胎培养皿内的培养液滴吸取至样品管中，并在样品管中加入蛋白酶抑制剂后，将这两者混合均匀制成待测样品；所述样品管中加入的培养液滴和蛋白酶抑制剂的体积之比为6:1～9:1，所述蛋白酶抑制剂为10×蛋白酶抑制剂；步骤三、将步骤二中制成的待测样品加入到384孔板中，384孔板的每个孔对应一样品管待测样品，并在每个孔中加入点样液后，将这两者混合均匀制成待点样样品；所述384孔板的每个孔中加入的待测样品和点样液的体积之比为1:1，所述点样液为灭菌过的1×磷酸盐缓冲液；步骤四、通过点样仪将步骤三中384孔板的孔内的待点样样品点到芯片上，每个孔内的待点样样品至少点6张芯片，将点好样的芯片在室温下的湿盒中放置1.5～2.5小时后，再放到温度为37℃的烘箱中烘干；步骤五、对步骤四中烘干后的芯片进行蛋白抗体的孵育，制成蛋白芯片；每张芯片上孵育一种特定蛋白抗体，总共孵育六种特定蛋白抗体，六种特定蛋白抗体对应的六种蛋白质分别为：载脂蛋白A2、载脂蛋白H、血红蛋白β亚基、血清类黏蛋白1、视黄醇结合蛋白4和丝氨酸蛋白酶抑制蛋白G1；步骤六、采用芯片扫描仪对步骤五中制成的每张蛋白芯片进行荧光检测，即可得到每张蛋白芯片上的每个微滴的荧光强度，代表每个微滴中特定蛋白质的含量；将得到的每个囊胚的六种蛋白质的含量分别与这六种蛋白质的标准含量进行比较，阳性结果越多的则代表此囊胚的发育质量越高；六种蛋白质的标准含量具体如下：载脂蛋白A2的荧光强度>220为阳性，载脂蛋白H的荧光强度>150为阳性，血红蛋白β亚基的荧光强度<540为阳性，血清类黏蛋白1的荧光强度>240为阳性，视黄醇结合蛋白4的荧光强度>950为阳性，丝氨酸蛋白酶抑制蛋白G1的荧光强度<1600为阳性。
所属类别：	发明专利