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原文传递 一种适用于木本植物内源激素测定的高效提取方法
专利名称: 一种适用于木本植物内源激素测定的高效提取方法
摘要: 本发明属于木本植物技术领域,公开了一种适用于木本植物内源激素测定的高效提取方法,称取柠檬叶,液氮速冻并研磨成粉末,加入甲醇溶液,放置4℃冰箱中过夜;加甲醇洗涤残渣,重复操作2次,合并上清夜;将过滤后的上清夜转入旋转蒸发瓶中,在36℃、弱光下减压蒸发至水相,取水相并用纯水洗涤旋转蒸发瓶1次;‑80℃冷藏10min后冻干;用pH=3.0的PBS4ml溶解;用4ml的乙酸乙酯10ml离心管萃取3次,留酯相弃水相;将乙酸乙酯相转入旋转蒸发瓶中,在36℃、弱光下减压蒸发至干,用A泵流动相溶解过小柱;水相,冷藏后冻干,直接保存;用5mL流动相溶解,得ZT;在进行HPLC分析前样品分别过0.22μm的微孔滤膜,作为供试液。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 福建;35
申请人: 福建省热带作物科学研究所
发明人: 牛先前;陈振东;林秀香;林秋金;苏金强;余智诚;谢晓清;卢志松
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810255590.0
公开号: CN108344824A
代理机构: 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230
代理人: 包晓静
分类号: G01N30/06(2006.01)I;G01N30/12(2006.01)I;G01N30/14(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/12;G01N30/14
申请人地址: 363001 福建省漳州市芗城区天宝镇五峰农场
主权项: 1.一种适用于木本植物内源激素测定的高效提取方法,其特征在于,所述适用于木本植物内源激素测定的高效提取方法包括:步骤一,称取柠檬叶0.2g,液氮速冻并研磨成粉末,加入冷却的80%甲醇溶液10ml,放置4℃冰箱中过夜;步骤二,加80%甲醇5mL洗涤残渣,重复以上操作2次,合并上清夜;过0.45μm滤头;步骤三,将过滤后的上清夜转入旋转蒸发瓶中,在36℃、弱光下减压蒸发至水相,取水相并用纯水洗涤旋转蒸发瓶1次,合计大概6ml;‑80℃冷藏10min后冻干,得干粉;用pH=3.0的PBS4ml溶解;步骤四,用4ml的乙酸乙酯10ml离心管萃取3次,留酯相弃水相;步骤五,将乙酸乙酯相转入旋转蒸发瓶中,在36℃、弱光下减压蒸发至干,用A泵流动相2mL溶解过Pak‑ODS‑C18小柱,5ml冲洗,得IAA、GA、ABA;取2ml冻存管保存,为分析前样品;步骤六,水相,‑80℃冷藏10min后冻干,后直接保存;步骤七,用5mL流动相溶解,得ZT;取2ml冻存管保存,为分析前样品;步骤八,在进行HPLC分析前样品分别过0.22μm的微孔滤膜,作为供试液。
所属类别: 发明专利
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