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一种食品中罗丹明B胶体金刚碳检测试纸条的制备方法
| 专利名称： | 一种食品中罗丹明B胶体金刚碳检测试纸条的制备方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种食品中罗丹明B胶体金刚碳检测试纸条的制备方法，该方法用黑色标记物胶体金刚碳代替胶体金显色，有明显的优势，检测线为微红色为阳性，变黑则为阴性。这样既保持了免疫法的快速，操作简单等有点，又提高了灵敏度和特异性。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 黑龙江;23 |
| 申请人： | 黑龙江八一农垦大学;北京艾旗斯德科技有限公司 |
| 发明人： | 殷奎德;张兴梅;张科;韩琰旭;陈发荣 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810269069.2 |
| 公开号： | CN108627506A |
| 分类号： | G01N21/78(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/78 |
| 申请人地址： | 163000 黑龙江省大庆市高新区新风路5号 |
| 主权项： | 1.一种食品中罗丹明B胶体金刚碳检测试纸条的制备方法，其特征在于包括以下步骤：S1：胶体碳金钢化：选择粒径在10‑100nm之间胶体碳溶液，接着在3个大气压的压力下煮沸胶体碳溶液30‑40min，然后于40‑60KHZ下超声30‑40min，得到均匀分散成的胶体金刚碳溶液，最后将其稀释成标准浓度的胶体金刚碳溶液；S2：取粒径为40nm的胶体金钢碳溶液100mL，调至pH＝7.2，分别标记抗体得到碳标抗体溶液；S3：先将碳标抗体溶液于常温、转速为1200‑1500rpm条件下离心20‑30min，弃去由凝聚的碳颗粒形成的沉淀，取黑色上清溶液于4℃在转速为8000r/min条件下离心30min，离心后溶液分为三层：透明上清液、管底可流动的黑色沉淀及管底壁上黑色致密的毯子碳颗粒层，将可流动的黑色沉淀转移到另外一个离心管中，用重悬液重悬至原量0.8倍，加入0.1％的叠氮钠4℃保存备用；S4：将样品垫和碳标抗体结合垫通过处理液进行水化和封闭处理：样品垫和结合垫经剪裁后通过浸蘸前处理液进行水化和封闭处理，浸泡30min后于温度37℃下烘干2小时，结合垫处理液为：含有终质量浓度为0.3％吐温‑20、2％海藻糖、10％蔗糖及pH值为7.2、浓度为0.01mol/L的PBS溶液；S5：将步骤S2碳标抗体溶液喷涂在碳标抗体结合垫上：喷涂机将碳标抗体在结合垫上均匀喷涂，喷样量在30μL/cm2，37℃真空干燥；S6：检测点抗原和控制点二抗的包被：分别将包被抗原均稀释到0.8mg/mL，二抗稀释到0.2mg/mL，点样在NC膜上分别为检测点和质控点，于温度37℃下干燥；S7：试纸条的组装：将2.4cm×0.8cmNC膜、1.8cm×0.8cm吸水纸、0.6cm×0.8cm胶体碳结合垫、1.5cm×0.8cm样品垫依次粘贴在PVC胶板上，即成胶体金刚碳试纸条大板。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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