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血清中25-羟基维生素D的高效液相色谱串联质谱检测方法
| 专利名称： | 血清中25-羟基维生素D的高效液相色谱串联质谱检测方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种血清中25‑羟基维生素D的高效液相色谱串联质谱检测方法，包括如下步骤：(1)样品预处理，其中，血清样品依次加入内标工作液和氢氧化钠溶液，混合均匀；(2)固液萃取处理，其中，步骤(1)处理后样品上样至固相支持液液萃取SLE 96孔板，用正己烷洗脱，洗脱液用氮气吹干；(3)衍生化反应，加入衍生化试剂4‑苯基‑1,2,4‑三唑啉‑3,5‑二酮(PTAD)溶液复溶，恒温反应，然后加入乙醇终止反应，氮气吹干；(4)复溶，采用基于多路复接系统(MPX)的高效液相色谱串联质谱法进行分析检测。本发明检测灵敏度高，专属性好，成本低廉，同时有效缩短样品前处理时间和分析时间，提高样品的检测效率。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 杭州凯莱谱精准医疗检测技术有限公司 |
| 发明人： | 富士山;马金飞;杨青青;康洲阳;刘华芬 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810633177.3 |
| 公开号： | CN108645942A |
| 代理机构： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 |
| 代理人： | 陈娟 |
| 分类号： | G01N30/06(2006.01)I;G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/88 |
| 申请人地址： | 310013 浙江省杭州市余杭区仓前街道海创科技中心3幢1603-2室 |
| 主权项： | 1.血清中25‑羟基维生素D的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品预处理：取50～200μL人血清加入到10～50μL内标工作溶液，涡旋混匀，再向其中加入100mmol/L氢氧化钠溶液50～200μL，涡旋混匀；(2)固液萃取处理：将步骤(1)中预处理样品上样到SLE96孔板上，静置5min，再将1～2mL正己烷分四次加入SLE96孔板进行洗脱，96孔接收板收集洗脱液，采用氮气吹干；(3)衍生化反应：将40～100μL PTAD衍生化工作溶液加入到步骤(2)的残渣中，涡旋0.5min，置于40～65℃烘箱恒温反应30min，稍冷却后加入20～50μL乙醇终止反应，涡旋1min，采用氮气吹干；(4)将步骤(3)得到的残渣，进一步用60～100μL复溶液复溶，涡旋使充分溶解，上基于多路复接系统MPX的高效液相色谱串联质谱系统进样10～20μL分析检测。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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