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原文传递通过HPLC-MS-MS法同时测定不同品种桂花中7种多酚类活性成分的含量的方法

专利名称：	通过HPLC-MS-MS法同时测定不同品种桂花中7种多酚类活性成分的含量的方法
摘要：	本发明提供了一种一种通过HPLC‑MS‑MS法同时测定不同品种桂花中7种多酚类活性成分的含量的方法，属于生化技术领域。用色谱柱Shim‑pack VP‑ODS(2.0×150mm,5μm)，以甲醇‑0.1％甲酸水为流动相，梯度洗脱，体积流量为0.2mL·min‑1，柱温30℃，进样量5μL；质谱采用ESI离子源，多反应监测的负离子扫描方式进行检测，结果7种成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系。精密度、重复性和稳定性良好；并符合方法学考察要求。所建立的方法简便，快速，灵敏，专属性强，可用于桂花中绿原酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷、柚皮苷、芦丁、阿魏酸和槲皮素7种多酚类活性成分的同时测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	湖北科技学院
发明人：	陈洪国;宋晓芳
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201811132480.1
公开号：	CN109030664A
代理机构：	咸宁鸿信专利代理事务所(普通合伙) 42249
代理人：	汪彩彩;阳会用
分类号：	G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06
申请人地址：	437100 湖北省咸宁市咸安区咸宁大道88号
主权项：	1.一种通过HPLC‑MS‑MS法同时测定不同品种桂花中7种多酚类活性成分的含量的方法，其特征在于，本方法包括如下步骤：1)、制备供试品溶液：称取2.5g桂花粉末，加入80％乙醇溶液50mL，称重后，超声提取30min，自然放冷，称重，用浓度为80％的乙醇溶液补足失重，摇匀，过滤；吸取1mL提取液稀释5倍，使用0.22μm的微孔滤膜过滤，得到桂花供试品溶液，平行制得各组待测样品溶液5份，供HPLC‑MS‑MS分析用；2)、配制标准品溶液：用电子天平分别称取各标准品0.005g，分别用5mL甲醇完全溶解后得到质量浓度为1mg·mL‑1的单一标准品储备液；3)、设置HPLC‑MS‑MS分析条件：其中，色谱柱条件为：色谱柱型号为Shim‑packVP‑ODS2.0×150mm，柱温为30℃，流动相为甲醇‑0.1％甲酸，梯度洗脱的流速0.2mL/min，进样量为5μL；质谱条件为：电喷雾负离子模式，电喷雾电压为3.5kV，雾化气体为N2，雾化气流速为3L/min；离子源温度为250℃；碰撞气体为高纯氮气；碰撞气压力为230kPa；采用多反应检测扫描方式；4)、本测定方法中的方法学考察：精密度的考察：准确吸取混合对照品溶液，在同一天内重复进样6次，计算日内精密度RSD；稳定性的考察：取混合对照品溶液，室温放置，在0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h进样分析，测定峰面积并计算RSD；重复性的考察：取丹桂样品6份，制作6组平行样品，进行平行实验测定并计算RSD值；加标回收率的考察：精密称取已测知7种物质含量的丹桂提取物共6份，分别加入适量混合标准品溶液，按步骤1)的方法准备样品进行分析，分别计算7种成分的平均回收率和RSD；线性关系的考察：取按照步骤2)的方法制备的对照品储备液适量，混合，再用甲醇水溶液稀释配制6个系列梯度浓度的混合对照品溶液；用步骤3)的HPLC‑MS‑MS方法进行检测；峰面积比值为纵坐标(y)，质量浓度为横坐标(x)，进行回归，以获得各成分在各自范围内的线性关系；样品中待测成分的含有量的测定：取3个品种的桂花按步骤1)的方法制备的供试品溶液，在步骤3)的色谱条件下测定。
所属类别：	发明专利