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原文传递血清中蔗糖测定方法

专利名称：	血清中蔗糖测定方法
摘要：	本发明公开了一种血清中蔗糖测定方法，属于利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：工具酶及指示酶同在试剂I中，试剂II仅有蔗糖酶有效成分；其测定方法为：血清中葡萄糖先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中葡萄糖与试剂Ⅰ反应生成醌亚胺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，蔗糖在蔗糖酶的作用下水解生成α‑D‑葡萄糖和β‑D‑果糖，水解生成的α‑D‑葡萄糖与试剂Ⅰ反应产生醌亚胺。仪器在540nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的醌亚胺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的醌亚胺计算出蔗糖的含量。本发明检测时不受内源性葡萄糖影响，其方法经济方便易行，不需要特殊检测设备，是一种准确性更高的蔗糖检测方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天津市宝坻区人民医院
发明人：	李立和;孙国忠;杨朕
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810318573.7
公开号：	CN108680569A
分类号：	G01N21/78(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/78
申请人地址：	301800 天津市宝坻区广川路8号
主权项：	1.一种血清中蔗糖测定方法，其特征在于：工具酶及指示酶同在试剂I中，试剂II中仅有蔗糖酶有效成分；其测定方法为：血清中葡萄糖先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中葡萄糖与试剂Ⅰ反应生成醌亚胺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，蔗糖在蔗糖酶的作用下水解生成α‑D‑葡萄糖和β‑D‑果糖，水解生成的α‑D‑葡萄糖与试剂Ⅰ反应产生醌亚胺，仪器在540nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的醌亚胺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的醌亚胺计算出蔗糖的含量。计算公式为：反应OD蔗糖＝OD2—OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]蔗糖浓度＝F×OD蔗糖其中OD蔗糖是蔗糖产生的吸光度。OD1是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度，OD2蔗糖是加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度，SV是样品的体积，R1V1是试剂Ⅰ的体积，R2V2是试剂Ⅱ的体积。F是校正因数。加入试剂II后OD1的稀释倍数为[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]，加入试剂II后的吸光度即为OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]。所以，由蔗糖产生的醌亚胺的吸光度为：OD蔗糖＝OD2‑OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]，即OD蔗糖＝OD2–(3+225)/(3+225+75)×OD1。只要测出OD1和OD2即可计算出蔗糖的浓度。
所属类别：	发明专利