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原文传递 血清中鸟嘌呤的测定方法
专利名称: 血清中鸟嘌呤的测定方法
摘要: 本发明公开了一种血清中鸟嘌呤的测定方法,属于利用可见光,通过测试反应结果颜色的变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是:试剂II中仅有鸟嘌呤脱氨酶有效组分,指示剂及其它有效组分同在试剂I中;其测定方法为:血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3~5分钟,血清中游离氨与试剂Ⅰ中α‑酮戊二酸、NADH在谷氨酸脱氢酶作用下生成NAD+,加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4~7分钟,鸟嘌呤在鸟嘌呤脱氨酶水解后生成氨,经反应生成NAD+,仪器在334nm~340nm波长处检测,以试剂Ⅰ反应产生的NAD+为空白,由试剂Ⅱ反应产生的NAD+可直接测出鸟嘌呤的含量。本发明检测时不受内源性游离氨影响,本方法是一种快捷、准确性更高的血清中鸟嘌呤检测方法。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 天津;12
申请人: 天津市宝坻区人民医院
发明人: 李立和;张超;李铮
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810439369.0
公开号: CN109085160A
分类号: G01N21/78(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/78
申请人地址: 301800 天津市宝坻区广川路8号
主权项: 1.一种血清中鸟嘌呤的测定方法,其特征在于试剂Ⅰ中含有谷氨酸脱氢酶,α‑酮戊二酸,NADH及适量防腐剂;试剂Ⅱ内含有鸟嘌呤水解酶及适量防腐剂;其测定方法为:待测血清样品与试剂Ⅰ于37℃温浴3~5分钟,血清中游离氨与试剂Ⅰ反应生成NAD+,加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4~7分钟,鸟嘌呤在鸟嘌呤脱氨酶水解后产生氨,经反应也生成NAD+,仪器在334nm~340nm波长处检测,以试剂Ⅰ反应产生的NAD+为空白,从试剂Ⅱ反应产生的NAD+计算出鸟嘌呤的含量,计算公式为:OD鸟嘌呤=OD2‑OD1×[SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]鸟嘌呤浓度=F×OD鸟嘌呤其中OD鸟嘌呤是鸟嘌呤产生的吸光度,OD1是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度,OD2是样品加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度,SV是血清样品的体积,R1V1是试剂Ⅰ的体积,R2V2是试剂Ⅱ的体积,F是校正因数。
所属类别: 发明专利
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