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原文传递采用一测多评法测定姜药材提取物中姜辣素含量的方法

专利名称：	采用一测多评法测定姜药材提取物中姜辣素含量的方法
摘要：	本发明公开了一种采用一测多评法测定姜药材提取物中姜辣素含量的方法，通过超高效液相色谱串联三重四级杆质谱检测器及紫外检测器的分离分析技术，借助一测多评方法，采用试样中不存在的性能稳定且易得的纯物质N‑香草基壬烷酰胺对照品作为内参物，建立该组分与试样中4个姜辣素组分之间的相对校正因子，通过校正因子计算，实现对姜药材提取物中的4个姜辣素组分的含量进行测定。本发明操作简单，灵敏度高，准确高效，成本低廉，可以客观，准确的评价姜药材提取物的品质，并用于质量控制，可解决因对照品缺乏而无法客观、合理地控制姜药材提取物质量的问题，对控制质量和保证疗效具有重要意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河南;41
申请人：	河南科高中标检测技术有限公司
发明人：	李智宁;李晓;魏磊;陈玲;王学方;王志尧;宋梦娇;魏悦;李飞飞;范毅;于立芹;崔炜;宁二娟
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810368262.1
公开号：	CN108709788A
代理机构：	郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104
代理人：	时立新
分类号：	G01N1/38(2006.01)I;G01N21/33(2006.01)I;G01N30/72(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N1;G01N21;G01N30;G01N1/38;G01N21/33;G01N30/72
申请人地址：	450000 河南省郑州市金水区红专路58号
主权项：	1.采用一测多评法测定姜药材提取物中姜辣素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备分别精密称定N‑香草基壬烷酰胺、6‑姜酚、8‑姜酚、10‑姜酚和6‑姜烯酚5种对照品，用甲醇溶解稀释，制得各单一对照品储备液，然后量取单一对照品储备液，用甲醇稀释混匀，制得混合对照品标准溶液；同时，配制质量浓度分别为CoL及CoH的N‑香草基壬烷酰胺标准溶液，CoL小于CoH；将混合对照品标准溶液及N‑香草基壬烷酰胺标准溶液冷冻避光保存；(2)供试品溶液的制备直接取姜药材提取物，加入步骤(1)制得的N‑香草基壬烷酰胺对照品储备液或N‑香草基壬烷酰胺标准溶液，混合并用溶剂定容，得到供试品溶液；或者将姜药材提取物用50％～100％甲醇稀释，得到提取物母液，再取提取物母液，加入步骤(1)制得的N‑香草基壬烷酰胺对照品储备液或N‑香草基壬烷酰胺标准溶液，混合并用溶剂定容，得到供试品溶液；供试品溶液中N‑香草基壬烷酰胺的含量为0.05～1.00μg/mL；(3)相对校正因子fox和相对保留时间RtR的计算用UPLC‑MS‑DAD进行测定，进样系列浓度的步骤(1)制备得到的混合对照品标准溶液，获得TIC色谱图和MRM色谱图并进行峰面积积分，选取N‑香草基壬烷酰胺为内参化合物，分别计算混合对照品标准溶液中N‑香草基壬烷酰胺对6‑姜酚、8‑姜酚、10‑姜酚、6‑姜烯酚的相对校正因子fox和相对保留时间RtR；所述校正因子fox的计算公式为：式中：Ao为内参物N‑香草基壬烷酰胺对照品的峰面积，Co为内参物N‑香草基壬烷酰胺对照品的质量浓度，Ax为被测组分对照品x的峰面积，Cx为被测组分对照品x的质量浓度；所述相对保留时间RtR的计算公式为：式中：tRx为被测组分对照品x的保留时间，tRo为内参物N‑香草基壬烷酰胺对照品的保留时间；(4)供试品中活性成分的测定取步骤(1)制备得到的N‑香草基壬烷酰胺标准溶液及步骤(2)制备得到的供试品溶液进样，用UPLC‑MS‑DAD进行测定，获得TIC色谱图和MRM色谱图，按公式计算供试品溶液中6‑姜酚、8‑姜酚、10‑姜酚、6‑姜烯酚的质量浓度；上述的公式为：C'x＝(C′xL+CxH')/2式中：Cx’为供试品溶液中被测定组分x的质量浓度，CxL’为供试品溶液中被测定组分x相对于浓度为CoL的N‑香草基壬烷酰胺标准溶液所计算出的质量浓度，CxH’为供试品溶液中被测定组分x相对于浓度为CoH的N‑香草基壬烷酰胺标准溶液所计算出的质量浓度，Ax’为供试品溶液中被测组分x的峰面积，AoL为CoL浓度N‑香草基壬烷酰胺标准溶液的峰面积，AoH为CoH浓度N‑香草基壬烷酰胺标准溶液的峰面积，fox为步骤(3)所得N‑香草基壬烷酰胺对被测组分的相对校正因子，N为浓度影响因数。
所属类别：	发明专利