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1.一种小体系连续快速测定海水溶解性铵盐的方法,其特征在于,包括以下步骤:A、标准工作曲线的制定:在两组各六个圆底旋盖2mL离心管中分别移入0.1μmol/L氯化铵标准溶液0、10、20、40、60、80μL,用超纯水稀释至1mL,混匀;加入100μL 50mg/mL次溴酸钠氧化剂溶液,混匀,反应30min;加入100μL 10g/L对氨基苯磺酰胺溶液,混匀,放置5min;加入20μL1g/L1‑奈替乙二胺二盐酸溶液溶液,充分混匀,放置15min后即可测定,颜色可稳定4h;颜色稳定后,吸取300μL待测溶液至标准平底96孔酶标板中,放置酶标仪内在543nm波长下测定各个样品吸光值(As),记录测定值;An=As‑Ab,其中Ab为空白吸光值,An为扣除空白后的吸光值,以An为纵坐标,铵盐‑氮的浓度Cs为横坐标绘制标准工作曲线,并用线性回归法求出标准工作曲线截距a和斜率b;求出其回归直线方程;B、水样测定:取离心后的水体样品1ml,加入到圆底旋盖2mL离心管中,再加入100μL 50mg/mL次溴酸钠氧化剂溶液,混匀,反应30min;加入100μL10g/L对氨基苯磺酰胺溶液,混匀,放置5min;加入20μL 1g/L 1‑奈替乙二胺二盐酸溶液,充分混匀,放置15min后即可测定,颜色可稳定4h;颜色稳定后,吸取300μL待测溶液至标准平底96孔酶标板中,放置酶标仪内在543nm波长下测定水体样品吸光值,该吸光值减去参比空白吸光值即为待测水样的吸光值Aw;C、铵盐氧化率测定各量取1.0ml盐度为5.0的人工海水和用盐度为5.0的人工海水配制含有1.0、5.0μmol/L氯化铵溶液,分别加入到圆底旋盖2mL离心管中,再分别加入100μL 50mg/mL次溴酸钠氧化剂溶液,混匀,反应30min;加入100μL10g/L对氨基苯磺酰胺溶液,混匀,放置5min;加入20μL1g/L 1‑奈替乙二胺二盐酸溶液,充分混匀,放置15min后即可测定,颜色可稳定4h;颜色稳定后,吸取300μL待测溶液至标准平底96孔酶标板中,放置酶标仪内在543nm波长下测定水体样品吸光值,其中Ab1、Ab2为1.0、5.0μmol/L铵盐溶液的吸光值(已扣除试剂空白), 和 分别为含有1.0、5.0μmol/L亚硝酸盐溶液的吸光值(已扣除试剂空白);D、铵盐氧化率的计算按照下式计算铵盐氧化率R: 公式中对应的字母代号如下表所示:Abn——为含有1.0或者5.0μmol/L铵盐溶液的吸光值; ——为1.0或者5.0μmol/L亚硝酸盐溶液的吸光值。E、计算水样中铵盐‑氮浓度按照下式计算: 式中:c(NH4+)——水样中氨盐浓度,单位为μmol/L; ——水样测得的平均吸光值;Ab——样品空白吸光值;a——标准工作曲线截距;b——标准工作曲线斜率。 |