主权项: |
1.一种血液及组织中甲酸浓度的检测方法,其特征在于,所述方法包括:(1)对大鼠进行甲醇灌胃染毒,同时提取甲醇中毒3天组和7天组的血、肝、肾、脑和胃组织;(2)采用MP* FastPrep‑24样品处理系统( MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, USA)处理组织,配合磁珠强大的振动作用,最大限度地将甲酸从心、肝、肾、脑和胃组织样本中提取出来,其中振荡速度设置为4.5m/s,时间为2‑3min;(3)将步骤(2)中获得的样本放在离心机中,10000rpm,离心10min;(4)取20µL步骤(3)获得的上清液进样HPLC检测;所述HPLC检测采用Thermo U3000 HPLC仪(Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA),色谱柱为CALESIL ODS‑100 C18 column (5 um, 4.6×250mm),进样20µL,流速控制在1mL/min, 流动相为甲醇与超纯水的混合物,二极管阵列检测器(Diode Array Detector,DAD),温度设置为周围环境; 在检测甲酸浓度前,拟检测波长设置为215nm;在空白溶剂中添加甲酸,以确定甲酸色谱峰的保留时间;为绘制标准曲线,一系列已知浓度的甲酸标准品溶液与流动相按照相同比例混合进样检测。 |