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原文传递一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法

专利名称：	一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法
摘要：	本发明公开了一种维生素K2(MK‑7)含量的检测方法，属于化合物含量检测技术领域，包括如下过程：A.样品预处理，B.配制对照品溶液，C.待测溶液的制备，D.利用高效液相色谱技术对标准对照品溶液进行测定，E.利用高效液相色谱技术对待测样品溶液进行测定，F.根据外标法计算待测样品中维生素K2(MK‑7)的含量C。本发明的检测方法能提高功效成分提取率，检测结果准确可靠，检测方法简便、高效；本发明的检测方法应用范围广泛，可用于含有七烯甲萘醌(MK‑7)保健食品、药品、普通食品或预混料等的含量快速测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	晨光生物科技集团邯郸有限公司
发明人：	王新艳;史晓彤;程永科;薛强
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-24T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201811579493.3
公开号：	CN109668980A
代理机构：	石家庄众志华清知识产权事务所(特殊普通合伙)
代理人：	张明月
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	056000 河北省邯郸市经济开发区邯临路以北、尚璧东街以东、时代大街以西
主权项：	1.一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于包括如下过程： A.样品预处理：①称取质量为M样的待测样品置于反应容器中，加入混合溶液，混合均匀后超声处理，然后离心取上清溶液；②向上清溶液中加入酸溶液，充分振荡后，将分层后的下层溶液去除；③向步骤②剩余的溶液中加入水，充分振荡后，将分层后的下层溶液去除；④收集步骤③上层的溶液，旋干，加入有机溶剂定容得到体积为V样的样品溶液； B.配制对照品溶液：称取维生素K2(MK-7)对照品，加入有机溶剂定容后得到浓度为C对的对照品溶液； C.待测溶液的制备：将样品溶液、对照品溶液分别经微孔滤膜进行过滤，得到待测样品溶液、标准对照品溶液； D.利用高效液相色谱技术对标准对照品溶液进行测定，得到维生素K2(MK-7)色谱峰的峰面积并记为A对，进样体积记为V对； E.利用同步骤D中相同的高效液相色谱技术条件对待测样品溶液进行测定，得到维生素K2(MK-7)色谱峰的峰面积并记为A样，进样体积记为V上样； F.根据外标法计算待测样品中维生素K2(MK-7)的含量C，计算公式为：式中C的单位为μg/g，V样的单位为mL，C对的单位为μg/mL，V对、V上样的单位为μL，M样的单位为g。 2.根据权利要求1所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：所述待测样品为固体时，先研磨成细粉再进行预处理；待测样品为液体时直接进行预处理。 3.根据权利要求1所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：所述混合溶液由极性溶剂和非极性溶剂混合而成。 4.根据权利要求3所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：所述极性溶剂为异丙醇、甲醇、乙醇、乙腈中的任一种；非极性溶剂为正己烷、石油醚、环己烷中的任一种。 5.根据权利要求4所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：所述混合溶液由正己烷和异丙醇混合而成。 6.根据权利要求5所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：所述正己烷和异丙醇的体积比为2～4:1。 7.根据权利要求1所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：所述酸为冰醋酸，酸溶液的浓度为2～4mol/L。 8.根据权利要求1所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：步骤A和步骤B中所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈中的任一种，且步骤A和步骤B中所用有机溶剂种类相同。 9.根据权利要求1所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于所述高效液相色谱的条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂或等效色谱柱；流动相包含乙腈和甲醇溶液，流动相流速为0.8～1.5mL/min，柱温为25～40℃，进样量为10～20μL，检测波长为紫外可见254nm。 10.根据权利要求9所述的一种维生素K2(MK-7)含量的检测方法，其特征在于：所述用流动相洗脱时为梯度洗脱，具体为在第0～10min流动相中乙腈的含量为70～80％、甲醇的含量为20～30％；在第10～20min流动相中乙腈的含量由70～80％匀速降为0、甲醇的含量由20～30％匀速升至70～80％；在第20～50min流动相为甲醇。
所属类别：	发明专利