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同时定量蛋白质丰度与半胱氨酸氧化水平的方法及其应用
| 专利名称： | 同时定量蛋白质丰度与半胱氨酸氧化水平的方法及其应用 |
| 摘要： | 本发明公开了一种同时定量蛋白质丰度与半胱氨酸氧化水平的方法，利用iTRAQ试剂和iodoTMT试剂的质量报告基团分子量不同和结合多肽位置不同的特征，应用iodoTMT试剂标记蛋白质半胱氨酸，同时应用iTRAQ试剂标记多肽氨基末端，实现同时检测半胱氨酸氧化还原水平和蛋白质表达丰度的变化，从而可准确判断蛋白质氧化还原水平的变化。本发明在另一方面还公开了上述方法在同时定量分析细胞、组织及体液等样品中蛋白质丰度与半胱氨酸氧化还原水平中的应用。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 上海;31 |
| 申请人： | 上海师范大学 |
| 发明人： | 戴绍军;喻娟娟;李莹;陈思学;秦智 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请号： | CN201810785005.8 |
| 公开号： | CN109142561A |
| 代理机构： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 |
| 代理人： | 冯子玲 |
| 分类号： | G01N30/02(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 200234 上海市徐汇区桂林路100号 |
| 主权项： | 1.一种同时定量蛋白质丰度与半胱氨酸氧化水平的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1、采用烷基化试剂封闭蛋白质上游离的巯基；步骤2、采用还原剂对已被可逆氧化修饰的半胱氨酸进行还原；步骤3、对还原后的蛋白质进行脱盐处理；步骤4、采用iodoTMT标签标记经脱盐处理后的所述蛋白质；步骤5、电泳分离步骤4中得到的所述蛋白质，并进行消化处理；步骤6、采用脱盐柱对步骤5中消化得到的多肽样品进行脱盐处理；步骤7、采用iTRAQ标签标记所述多肽样品；步骤8、采用所述脱盐柱对所述iTRAQ标签标记后的多肽样品进行脱盐处理；步骤9：采用超高效液相色谱分离步骤8中脱盐处理后的所述多肽样品；步骤10、采用高分辨质谱仪鉴定各分级多肽样品；步骤11、搜索相应的蛋白质数据库，并对搜库结果进行分析。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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