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高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法
| 专利名称： | 高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种高效准确检测乳腺细胞癌变的检测方法，包括步骤1，试验用细胞株进行消化吹打处理形成细胞悬液；步骤2，用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度；步骤3，用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次；步骤4，将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪记录细胞内DCF（特异性荧光染料）的荧光光子数响应。本发明实时检测揭示了在癌细胞中比正常细胞有明显更高的氧化响应，为在纳米级的环境中探测化学动力学以阐明关键生物过程提供了一个独特的应用方向。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 江苏瑞明生物科技有限公司 |
| 发明人： | 徐艇 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请号： | CN201811078847.6 |
| 公开号： | CN109142197A |
| 代理机构： | 上海海颂知识产权代理事务所(普通合伙) 31258 |
| 代理人： | 任益;闫玉芳 |
| 分类号： | G01N15/10(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N15 |
| 申请人地址： | 214200 江苏省无锡市宜兴经济开发区杏里路10号宜兴光电产业园 |
| 主权项： | 1.一种高效准确超灵敏检测乳腺细胞癌变的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤1，选择人乳腺上皮细胞株（MCF10A）、人乳腺癌细胞株（MCF7）、HER2过表达的MCF7细胞株（MCF7/HER2）作为试验用细胞株，并对试验用细胞株进行消化吹打处理形成细胞悬液；步骤2，用血球计数板测定细胞悬液中的细胞密度，以细胞密度为1×104个细胞/cm2接种到细胞浴槽的盖玻片上用于细胞附着；步骤3，细胞分别附着24h、24.5h、25h、25.5h后，用PBS缓冲液冲洗粘附在盖玻片上的细胞3次，在37℃ 用染料DCFH‑DA染色细胞30分钟，孵育后，将染色的细胞用PBS缓冲液冲洗三次后向细胞浴槽中加入100μl的PBS缓冲液；步骤4，将细胞浴槽放入纳米光电生化检测仪，调整纳米探头与细胞的相对位置，检测过程中添加刺激物PMA并同时记录细胞内DCF的荧光光子数响应。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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