主权项: |
1.黄连花薹的品质评价方法,其特征在于包括如下步骤:(1)原料准备将待评价的黄连花薹按生长地的海拔高度、生长年限、产地及干燥方式分为不同的批次,并将各批次的黄连花薹加工成粗粉;(2)黄连花薹总黄酮的测定a.供试品溶液的制备:取黄连花薹粗粉0.5g,置具塞锥形瓶中,加入甲醇25±5mL,称定重量,加热回流30±5min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液;b.对照品溶液的制备:取芦丁对照品50.03mg,置25mL量瓶中,加甲醇适量,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀,转移至250mL量瓶中,用少量水分数次洗涤25mL量瓶,洗液一起并入250mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得每1mL中含芦丁0.20mg的对照品溶液;c.绘制总黄酮浓度与吸光度的标准曲线:量取对照品溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL,分别置25mL量瓶中,各加水至6mL,并加5.0%亚硝酸钠溶液1mL,混匀,放置6分钟,再加10%硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,以相应的试剂为空白,按照紫外‑可见分光光度法,在500nm波长处测定吸光度,以吸光度为横坐标,对照品浓度为纵坐标,绘制标准曲线,得线性回归方程;d.测定总黄酮:量取不同批次的供试品溶液1mL,分别置25mL容量瓶中,加水至6.0mL,并加5.0%亚硝酸钠溶液1mL,混匀,放置6分钟,再加10%硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,以相应的试剂为空白,按照紫外‑可见分光光度法,在500nm波长处测定吸光度,将测得的吸光度分别代入上述线性回归方程,即可计算出各批次黄连花薹的总黄酮含量;(3)盐酸小檗碱的测定a.供试品溶液的制备:取黄连花薹粗粉约0.2g,置具塞锥形瓶中,加入体积比为100:1的甲醇—盐酸的混合溶液50±5mL,密塞,称定重量,超声处理30±5min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,量取续滤液2mL,置5mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液;b.系列对照品溶液的制备:取盐酸小檗碱对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.5348mg的溶液,得对照品储备液,吸取盐酸小檗碱对照品储备液0.5mL、1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL,分别置10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得浓度为26.74μg·mL‑1、53.48μg·mL‑1、80.22μg·mL‑1、106.96μg·mL‑1、133.70μg·mL‑1、160.44μg·mL‑1的系列对照品溶液;c.绘制盐酸小檗碱浓度与峰面积的标准曲线色谱条件与系统适应性:Supersil ODS2色谱柱;流动相为体积比为50:50的乙腈‑0.05mol·L‑1磷酸二氢钾溶液;检测波长为345nm,进样量10μL;将上述系列对照品溶液按照上述色谱条件进样,测定峰面积,并以峰面积为纵坐标,盐酸小檗碱浓度为横坐标,绘制标准曲线,得线性回归方程;d.测定盐酸小檗碱:取不同批次的供试品溶液,按照上述色谱条件进样,测定峰面积,将测得的峰面积分别代入上述线性回归方程,即可计算出各批次黄连花薹的盐酸小檗碱含量;(4)计算综合评分a.将各批次黄连花薹干燥方式中耗时最小的时间规定为单位1,每增加50h依次递减0.1,得各批次黄连花薹干燥时间转化值;b.将测得的各批次黄连花薹的总黄酮含量和盐酸小檗碱含量代入公式:综合评分=40×盐酸小檗碱含量/最大盐酸小檗碱含量+30×总黄酮含量/最大总黄酮含量+30×干燥时间转化值/最大干燥时间转化值中计算出各批次黄连花薹的综合评分;式中最大盐酸小檗碱含量、最大总黄酮含量、最大干燥时间转化值是指所有批次黄连花薹中盐酸小檗碱含量的最大值、总黄酮含量的最大值、干燥时间转化值的最大值;(5)验证应用“IBM SPSS Statistics”软件对各批次黄连花薹进行系统聚类分析,聚类分析的结果与综合评分的结果至少80%吻合。 |