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原文传递一种基于HPLC、UV-Vis技术的荆芥药材质量综合检测鉴别方法

专利名称：	一种基于HPLC、UV-Vis技术的荆芥药材质量综合检测鉴别方法
摘要：	一种基于HPLC、UV‑Vis技术的荆芥药材质量综合检测鉴别方法，涉及中药材的检测与鉴别技术领域，该方法是运用层次分析法将HPLC指纹图谱和UV‑Vis含量测定等技术进行综合分析，进行综合分数评价，获得更加可靠的实验数据，为荆芥综合开发利用提供理论参考。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	河北中医学院
发明人：	郑玉光;马东来;温子帅;李菁;刘露露
专利状态：	有效
申请号：	CN201811009598.5
公开号：	CN109507305A
代理机构：	北京思海天达知识产权代理有限公司 11203
代理人：	张立改
分类号：	G01N30/02(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	050018 河北省石家庄市裕华区方兴路88号
主权项：	1.一种基于HPLC、UV‑Vis技术的荆芥药材质量综合检测鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：1.1荆芥药材指纹图谱的建立方法包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：精密称取过65目筛荆芥粉末2.0g，置于50ml锥形瓶，精密加入75％甲醇溶液25mL，称定重量，超声提取20min，取出，冷却至室温，再称定重量，用75％甲醇补足减失重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)高效液相色谱检测：吸取上述步骤(1)所得供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录65min内的指纹图谱：其中，指纹色谱条件为：采用Amethyst HC‑C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈(A)‑0.2％磷酸溶液(B)，梯度洗脱(0～15min，10％～14％A；15～40min，14％～26％A；40～55min，26％～60％A；55～60min，60％～85％A；60～65min，85％A)；检测波长：235nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；本荆芥药材指纹图谱，由16个共有指纹峰构成，所述指纹图谱的16个共有指纹峰的相对保留时间范围及相对标准偏差如下：表1中药材荆芥中16个共有指纹峰信息其中，从16个主要峰中探明了8个成分，分别为咖啡酸、木犀草苷、槲皮苷、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、香叶木素、胡薄荷酮，其中咖啡酸、木犀草苷、槲皮苷、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、香叶木素、胡薄荷酮分别对应指纹峰的编号1、2、3、4、8、10、11、14，并分别进行咖啡酸、木犀草苷、槲皮苷、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、香叶木素、胡薄荷酮峰面积和量的标准曲线测定，然后分别测得荆芥药材中的咖啡酸、木犀草苷、槲皮苷、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、香叶木素、胡薄荷酮的含量，mg/g；1.2总黄酮及总多糖检测方法的建立，包括如下步骤：(1)总黄酮的含量测定供试品溶液的制备：精确称取不同产地脱脂荆芥药材粉末2g，置100ml锥形瓶中，按料液比1∶40，单位g：ml，加入质量百分比浓度60％乙醇25ml，60℃下提取45min，冷却并过滤(滤渣备用)，再将提取液定容于100ml容量瓶中，即得供试品溶液。紫外分光光度计检测：分别定量精密移取供试品溶液，置25mL量瓶中，加5％亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀，放置5min后，精确加入质量百分比浓度10％硝酸铝溶液0.75ml摇匀，放置5min。再精确加入1mol/L氢氧化钠溶液10ml，用质量百分比浓度60％乙醇稀释至刻度。于510nm波长下测定吸光度A，从吸光度和浓度的标准曲线中读出浓度，计算出总黄酮含量mg/g；采用芦丁制备吸光度A和浓度的标准曲线；(2)总多糖含量测定供试品溶液的制备：精确称取上述脱黄酮后的滤渣2g，置100ml锥形瓶中，按料液比1∶20，单位g：ml，加入蒸馏水25ml，60℃下提取50min，冷却并过滤，定容于25ml容量瓶，再取适量定容于25ml容量瓶中，即得供试品溶液。紫外分光光度计检测：精密移取供试品溶液适量，置25mL容量瓶中，分别加入质量百分比浓度5％苯酚溶液1mL，迅速摇匀，加入浓硫酸50mL，放10mn，置90℃水浴中保温15min，于490nm波长下测定吸光度A，从吸光度和浓度的标准曲线中读出浓度，计算出总多糖含量mg/g；采用葡萄糖制备吸光度A和浓度的标准曲线；(3)基于层次分析法的中药材荆芥的综合分析分别给予咖啡酸、木犀草苷、槲皮苷、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、香叶木素、胡薄荷酮、总黄酮和多糖的加权系数，求出综合评分(Fb)，根据综合评分，得到效果优劣；b＝1，2，3，……，n，代表的是待比较、鉴别和检测的不同的荆芥；上述的mb代表所对应的物质在荆芥中的含量，单位为单位均为mg·g‑1。
所属类别：	发明专利