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原文传递一种大蒜白腐菌粗毒素鉴定方法

专利名称：	一种大蒜白腐菌粗毒素鉴定方法
摘要：	本发明属于植物病害预防技术领域，具体涉及一种大蒜白腐菌粗毒素鉴定方法。该方法包括菌株培养，提取大蒜白腐病菌粗毒素等步骤。本发明的创新点主要体现在用不同方法提取了大蒜白腐病菌粗毒素并进行了生物活性检测及结构鉴定。在大蒜白腐病菌粗毒素提取及鉴定方面均首先提出了一系列简单有效的方法。结果表明，用该方法提取的大蒜白腐病菌粗毒素可引起大蒜病斑产生，表明其具有生物活性。这为今后研究大蒜白腐病菌粗毒素提供了较为可靠简便的方法。同时，粗毒素组成成分的鉴定也为进一步研究其致病机理打下了坚实的基础，为今后植物抗病育种的研究提供了理论指导。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏省农业科学院
发明人：	魏利辉;王晓宇
专利状态：	有效
申请号：	CN201811501051.7
公开号：	CN109541092A
分类号：	G01N30/14(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	210014 江苏省南京市玄武区孝陵卫钟灵街50号
主权项：	1.一种大蒜白腐菌粗毒素鉴定方法，其方法如下：1)菌种的转接及培养把保存于PDA固体斜面培养基上的大蒜白腐病菌转接到PDA固体培养基上，并置于设置温度为18℃恒温培养箱中培养72h。把转接好的大蒜白腐病菌挑2块菌丝接种到20mL液体查彼克培养基(Czapek‑Doxmedium)中，置于摇床上振荡培养约4‑7d，温度为18℃，直至长出大量菌丝又不产生黑色菌核。2)粗毒素的提取把获得的菌培养液进行过滤，滤液分别进行旋转蒸发，正丁醇抽提，离心去沉淀后获得粗毒素。3)粗毒素的致病性鉴定取大蒜品种为G18的叶片，在叶片上用牙签刺形成伤口，粗毒素处理后观察病斑。4)粗毒素的组分鉴定将提取出的粗毒素溶于正己烷中，定溶至1mL。提取物用气质联用仪进行结构分析。其质谱条件：离子源为EI源，传输线温度：280℃；离子源温度：300℃；电子能量：70eV；扫描范围(m/z)：40‑550amu，采用全扫描采集模式。
所属类别：	发明专利