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一种液质联用测定血浆中地塞米松浓度的方法
| 专利名称： | 一种液质联用测定血浆中地塞米松浓度的方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种液质联用测定血浆中地塞米松浓度的方法，采用液质联用系统测定，先取待测样品，加入一定量的混合有机溶剂进行萃取两次，预处理后，经色谱柱分离，用质谱检测器检测。本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，为地塞米松的血药浓度测定提供依据；本方法的血浆标准曲线线性范围为0.1～20ng/mL，批内和批间精密度RSD均小于±15％，适合于测定血浆中地塞米松的浓度。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 徐州佳生医药科技有限公司 |
| 发明人： | 林明弘 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请号： | CN201811451019.2 |
| 公开号： | CN109541108A |
| 代理机构： | 徐州市淮海专利事务所 32205 |
| 代理人： | 李妮 |
| 分类号： | G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 221000 江苏省徐州市泉山区软件园路6号徐州软件园1号楼C座701室 |
| 主权项： | 1.一种液质联用测定血浆中地塞米松浓度的方法，其特征在于：血浆样品经预处理后经高效液相色谱‑串联质谱检测其浓度，具体方法包括以下步骤：(1)血浆样品预处理：血浆以K2EDTA为抗凝剂，以地塞米松‑d5为内标；于贴有标签的玻璃试管中加入100uL的血浆样品，加入5uL的体积比为1：1的乙腈水溶液，混匀后加入20uL的0.01ng/uL的内标地塞米松‑d5溶液，混匀后加入20uL1mol/L的磷酸氢二钾，混匀后再向试管中加入3mL甲基叔丁基醚，涡旋混合1min，于20℃以3000rpm离心5min，取有机溶液层及标签转移至另一干净试管，于纯净空气流下，35℃蒸发干燥至少15min至试管完全干燥，于试管中回溶400uL有机溶液，有机溶液为水：乙腈：甲酸按照体积比70：30：0.1混合得到的混合物，涡旋混匀1min后，将试管中的溶液转移至96深孔板中，作为测试样品待检测；(2)试样测定：取10uL测试样品注入高效液相色谱‑串联质谱仪中，检测样品中地塞米松和内标地塞米松‑d5的色谱峰，并据此计算所述血浆样品中的地塞米松浓度；(3)液相色谱测定，条件为：色谱柱：Agilent ZORBAX XDB‑C18，5um，柱规格为50×2.1mm；色谱柱温：40℃；流动相A：水/甲酸的体积百分比为100/0.1；流动相B：乙腈/甲酸的体积百分比为100/0.1；洗液：乙腈/水的体积百分比为50/50；自动进样器温度为15℃；梯度洗脱，流速为0.4mL/min，进样量为10uL，分析时间3.5min；(4)质谱测定，条件为：离子源为电喷雾离子源，喷雾电压为3800V，雾化温度为480℃，喷雾气压力为30Psi，辅助加热气压力为30Psi，气帘气压力为20Psi，碰撞气压力为8Psi，去簇电压分别为25eV的地塞米松和地塞米松‑d5；碰撞室入口电压分别为8eV的地塞米松和地塞米松‑d5；碰撞电压分别为15eV的地塞米松和地塞米松‑d5；碰撞室出口电压分别为15eV的地塞米松和地塞米松‑d5；正离子方式检测；扫描方式为多重反应监测；用于定量分析的离子反应分别为：m/z393.2→m/z355.3，其为地塞米松；和m/z398.2→m/z360.2，其为地塞米松‑d5。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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