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原文传递当归标准汤剂指纹图谱、特征图谱建立及含量测定方法

专利名称：	当归标准汤剂指纹图谱、特征图谱建立及含量测定方法
摘要：	本发明公开一种当归标准汤剂指纹图谱、特征图谱建立及含量测定方法，指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备；2)色谱条件及系统适用性试验；3)将供试品溶液注入液相色谱仪，测定，得到指纹图谱。通过对当归标准汤剂的超高效液相色谱指纹图谱的研究，得到了一种较好的当归标准汤剂指纹图谱，为控制该制剂质量提供了新的技术方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	国药集团德众(佛山)药业有限公司
发明人：	相雨;杜蔼媚;卢国扬;马存
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-20T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910418740.X
公开号：	CN110068628A
代理机构：	佛山市海融科创知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	陈志超;罗尹清
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	528000 广东省佛山市禅城区佛平路89号
主权项：	1.一种当归标准汤剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)供试品溶液的制备：取当归标准汤剂，加水，进行超声提取，离心，过滤； 2)色谱条件及系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％甲酸溶液为流动相B；柱温为30-40℃；流速为0.2-0.4ml/min，检测波长为270nm；其中，梯度洗脱程序如下：0～3min，流动相A：0％，流动相B：100％；3～5min，流动相A：0％→4％，流动相B：100％→96％；5～16min，流动相A：4％→30％，流动相B：96％→70％；16～17min，流动相A：30％→100％，流动相B：70％→0％；17～20min，流动相A：100％，流动相B：0％； 3)将步骤1)制备的供试品溶液注入液相色谱仪，以步骤2)的条件测定，得到指纹图谱。 2.根据权利要求1所述的当归标准汤剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤1)中，取当归标准汤剂0.2g，加入水25ml，超声提取10分钟；所述超声提取过程中功率为400W，频率为40kHz。 3.根据权利要求1所述的当归标准汤剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤2)中为采用CORTECS UPLC T3色谱柱，填料粒径为1.6μm，内径2.1，柱长100mm；柱温为30℃；流速为0.3ml/min；步骤3)中供试品溶液的用量为5μl。 4.根据权利要求1所述的当归标准汤剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，还包括以下步骤： 4)将得到的指纹图谱与对照图谱进行相似度计算；所述对照图谱如图15所示。 5.一种当归标准汤剂特征图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)参照物溶液的制备：取阿魏酸对照品，加甲醇制成每1ml含12μg的溶液； 2)供试品溶液的制备：取当归标准汤剂，加水，进行超声提取，放冷，用水补足减失的重量，离心，过滤； 3)色谱条件及系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％甲酸溶液为流动相B；柱温为30-40℃；流速为0.2-0.4ml/min，检测波长为270nm；其中，梯度洗脱程序如下：0～3min，流动相A：0％，流动相B：100％；3～5min，流动相A：0％→4％，流动相B：100％→96％；5～16min，流动相A：4％→30％，流动相B：96％→70％；16～17min，流动相A：30％→100％，流动相B：70％→0％；17～20min，流动相A：100％，流动相B：0％； 4)将参照物溶液、供试品溶液注入液相色谱仪，测定，得到特征图谱。 6.根据权利要求5所述的当归标准汤剂特征图谱的建立方法，其特征在于，步骤2)中，取当归标准汤剂0.2g，加入水25ml，超声提取10分钟；所述超声提取过程中功率为400W，频率为40kHz。 7.根据权利要求5所述的当归标准汤剂特征图谱的建立方法，其特征在于，步骤3)为采用CORTECS UPLC T3色谱柱，填料粒径为1.6μm，内径2.1，柱长100mm；柱温为30℃；流速为0.3ml/min；步骤4)中，参照物溶液用量为1μl，供试品溶液用量为5μl。 8.根据权利要求5所述的当归标准汤剂特征图谱的建立方法，其特征在于，还包括以下步骤： 4)将得到的特征图谱，供试品特征图谱中应有7个特征峰，其中与阿魏酸参照物溶液相应的峰为S峰，计算特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％之内；相对保留时间规定值为：峰1，0.199；峰2，0.374；峰3，0.431；峰4，0.655；峰5，1；峰6，1.163；峰7，1.207。 9.一种当归标准汤剂的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)参照物溶液的制备：取阿魏酸对照品，加甲醇制成每1ml含12μg的溶液； 2)供试品溶液的制备：取当归标准汤剂，加水，进行超声提取，放冷，用水补足减失的重量，离心，过滤； 3)色谱条件及系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.085％磷酸溶液为流动相，乙腈-0.085％磷酸溶液的体积比为17：83；柱温25-40℃；检测波长为316nm，流速为0.2-0.8ml/min；理论板数按阿魏酸峰计算应不低于4000； 4)吸取对照品溶液和供试品溶液各1～5μl，注入液相色谱仪，测定供试品溶液的阿魏酸含量。 10.根据权利要求9所述的当归标准汤剂的含量测定方法，其特征在于，步骤2)中，取当归标准汤剂0.2g，加入水25ml，超声提取30分钟；所述超声提取过程中，功率为400W，频率为40kHz；步骤3)中，采用CORTECS UPLC C18色谱柱，填料粒径为2.7μm，内径4.6，柱长50mm，柱温为30℃，流速为0.5ml/min；步骤4)中，对照品溶液用量为2μl，供试品溶液用量为2μl。
所属类别：	发明专利