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原文传递一种测定药物分布的方法

专利名称：	一种测定药物分布的方法
摘要：	本发明公开了一种测定药物分布的方法，其包括以下步骤：1)测定药物的血液/水、脂肪/水、蛋白质/水分配系数；2)建立药物在各个组织吸收和分布的体外模型式，所述体外模型式为：PCt＝vlPl+vpPp+vwPw，通过体外模型式可以得出药物在人体各个组织(器官)浓度/血药浓度的分配系数。本发明所提供的测定药物分布的方法，具有操作简单、方便，且其还能同时预测一个药物在人体多个器官(心、脑、肝、肾、肺、肌肉、脂肪)中的吸收和分布情况，为更加简便、快捷地进行药物分布的研究提供了新的方向。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京师范大学
发明人：	张华北;杨晓;李仕林;农姻铃
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910340219.9
公开号：	CN110108866A
代理机构：	北京易正达专利代理有限公司
代理人：	陈桂兰
分类号：	G01N33/50(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100875 北京市海淀区新街口外大街19号
主权项：	1.一种测定药物分布的方法，其特征在于，其包括以下步骤： 1)测定药物的血液/水、脂肪/水、蛋白质/水分配系数； 2)建立药物在各个组织吸收和分布的体外模型式，所述体外模型式为： PCt＝Ct/Cb ＝[(ClVl+CpVp+CwVw)/Vt]/Cb ＝(Vl/Vt)(Cl/Cb)+(Vp/Vt)(Cp/Cb)+(Vw/Vt)(Cw/Cb) 其中Cl、Cp和Cw分别是药物在某组织的脂肪、蛋白质和血液中的浓度，Vl、Vp和Vw分别是某个组织中脂肪、蛋白质和水中的体积；体积分数vi＝Vi/Vt(i＝l，p，w) 分配系数Pj＝Cj/Cb(j＝l，p，w) 因此PCt＝vlPl+vpPp+vwPw，通过所述体外模型式可以计算出药物在人体各个组织(器官)浓度/血药浓度的分配系数。 2.根据权利要求1所述的测定药物分布的方法，其特征在于，所述药物的脂肪/水分配系数测定方法为：配置一定浓度的药物溶液，用紫外光度计测吸光度，通过药物-PBS溶液标准吸收方程算出药物的初始浓度Cl(1)(μg/mL)；将猪脂肪取出后待其融化，用差量法称取Ml(g)猪脂肪放在透析袋中，用透析夹封口；取体积VlmL的药物溶液于保鲜袋，将猪脂肪的透析袋完全浸泡在药物溶液中，封口；每隔半小时测取一次药物溶液作为样品，标记并测定其吸光度，直至吸光度下降到最小值，最小吸光度对应的的浓度为达到透析平衡后的溶液浓度Cl(2)(μg/mL)；被脂肪吸收的药物的质量Wl＝Cl(1)×Vl-Cl(2)×Vl 药物在脂肪相中的浓度Cl＝Wl×ρl/Ml(ρl可以通过排水体积法测得) 药物的脂肪/水分配系数Pl＝Cl/Cl(2)。 3.根据权利要求1所述的测定药物分布的方法，，其特征在于，所述药物的蛋白质/水分配系数的测定方法为：配置一定浓度的药物溶液，用紫外光度计测吸光度，通过药物-PBS溶液标准吸收方程算出药物的初始浓度Cp(1)(μg/mL)；称取Mp(g)蛋白质放在透析袋，用透析夹封口；取体积VpmL的药物溶液于保鲜袋中，将蛋白质的透析袋完全浸泡在药物溶液中，封口，在4摄氏度下保存；每隔半小时取一次药物溶液作为样品，标记并测定其吸光度，直至吸光度下降到最小值，小吸光度对应的的浓度为达到透析平衡后的溶液浓度Cp(2)(μg/mL)；被蛋白质吸收的药物的质量Wp＝Cp(1)×Vp-Cp(2)×Vp 药物在蛋白质中的浓度Cp＝Wp×ρp/MP(ρp可以通过排水体积法测得) 药物的蛋白质/水分配系数Pp＝Cp/Cp(2)。 4.根据权利要求2所述的测定药物分布的方法，其特征在于，所述脂肪通过如下方式获得：将猪肉切成小块，置于冰箱冷冻室中待用；将索氏提取器洗净干燥，取适量脱脂棉置于索氏提取器管底，注意将底部的管口严密覆盖，再加入少量石油醚润湿，用玻璃棒将脱脂棉压实，再把切好的猪肉放入索氏提取器内，注意最高高度不得超过细管高度；取洁净干燥的500mL蒸馏烧瓶，加入石油醚至烧瓶2/3，然后加入一枚磁子，连接索氏提取器和球型冷凝管，用铁架台固定，用油浴锅在95摄氏度加热，接通冷凝水，打开磁力搅拌器，持续抽提10小时左右；取下冷凝管和索氏提取器，将猪肉倒掉，重新用脱脂棉垫底，加入新的猪肉，然后重复上述步骤抽提猪脂肪；重复4～5次后取下索氏提取器和冷凝管，关闭油浴锅和冷凝水，加入100mL二次水清洗提取液，反复三次；然后取出磁子，用分液漏斗分液，留下有机相与锥形瓶中(溶液量大，可分多次分液，置于多个锥形瓶中)；再加入无水硫酸钠干燥有机相，干燥半小时后过滤，将滤液收集于蒸馏烧瓶中，连接旋转蒸发仪，设定稳定45摄氏度，除尽石油醚；所得猪脂肪密封并放入冰箱冷冻室待用。 5.根据权利要求3所述的测定药物分布的方法，其特征在于，所述蛋白质通过如下方式获得：取一个2000mL大烧杯，用二次水清洗干净；取一定量的牛血清白蛋白放入透析袋中，上下用透析夹夹紧封口，注意蛋白质加入量不宜过多，至少留出1/5的空间，以免清洗后续过程中吸水涨破透析袋；将装好的蛋白质透析袋放入干净的大烧杯中，一次可放入多个透析袋，往大烧杯中加入大量的二次水，使透析袋被水完全淹没，并且将烧杯用保鲜膜封口，放在4摄氏度冷藏；在时间点24小时，36小时，48小时测一次紫外(透析过程中前24小时要每隔2小时换一次水，后面每隔5小时换一次水)，知道紫外检测不出吸光度，说明已通过透析清除了牛血清白蛋白中的小分子杂质；将蛋白质从透析袋中倒入清洁干燥的200mL烧杯中，置于干燥箱中干燥，设置温度为37摄氏度；直到蛋白质彻底干燥，用刮刀将黏在杯壁上的蛋白质刮下放在锥形瓶中，把锥形瓶封口并放在4摄氏度下冷藏保存。
所属类别：	发明专利