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原文传递一种大麻HPLC指纹图谱测定方法

专利名称：	一种大麻HPLC指纹图谱测定方法
摘要：	本申请提供了一种大麻HPLC指纹图谱测定方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：取大麻药材，粉碎，过筛，烘烤，取烘烤后的大麻药材粉末精密称定，加入提取剂，超声提取，放至室温，过微孔滤膜，取续滤液即得；(2)对照品溶液的制备：分别取大麻二酚酸、次大麻二酚、大麻萜酚、大麻二酚、Δ9‑四氢化次大麻酚、大麻环萜酚、四氢大麻酚、香叶基黄酮A对照品，加入甲醇溶解，制成对照品溶液；(3)测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定，并记录色谱图。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	汉义生物科技(北京)有限公司
发明人：	谭昕;张景;孙武兴;王曙宾;邢俊波
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910463271.3
公开号：	CN110133148A
代理机构：	北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	张丹
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	100020 北京市朝阳区呼家楼(京广中心)1号楼26层13室
主权项：	1.一种大麻HPLC指纹图谱测定方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)供试品溶液的制备：取大麻药材，粉碎，过筛，烘烤，取烘烤后的大麻药材粉末精密称定，加入提取剂，超声提取，放至室温，过微孔滤膜，取续滤液即得； (2)对照品溶液的制备：分别取大麻二酚酸、次大麻二酚、大麻萜酚、大麻二酚、Δ9-四氢化次大麻酚、大麻环萜酚、四氢大麻酚、香叶基黄酮A对照品，加入甲醇溶解，制成对照品溶液； (3)测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定，并记录色谱图。 2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(1)中所述大麻药材选自：大麻叶、大麻花、大麻根、大麻秸秆和大麻种子中的一种或两种以上以任意比例的组合，优选为大麻花和/或大麻叶；步骤(1)中所述提取剂为有机溶剂，其中所述有机溶剂选自：乙醇、甲醇、异丙醇、乙酸乙酯和丙酮中的一种或两种以上以任意比例的组合，优选为乙醇。 3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(1)中所述大麻药材烘烤的温度为100-140℃，烘烤时间为60-150分钟；所述提取剂的浓度为90-98％；所述提取剂的用量为50-200ml/g大麻药材粉末；所述超声提取的功率为100-600W，频率10-50kHz；所述超声提取的时间为5-60分钟。 4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(1)中所述大麻药材烘烤的温度为120℃，烘烤时间为90分钟；所述提取剂为95％乙醇；所述提取剂的用量为70ml/g大麻药材粉末；所述超声提取的功率为400W，频率30kHz，所述超声提取的时间为10分钟。 5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其中，所述高效液相色谱仪采用混合型硅胶基质高效液相色谱填料，优选为C18、C8或CN键合硅胶填料；所述测定采用梯度洗脱程序，所述梯度洗脱程序如下：洗脱时间为0-15分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：25-30％，流动相B：余量；洗脱时间为15-30分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：由25-30％梯度变化为20-25％，流动相B：余量；洗脱时间为30-45分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：20-25％，流动相B：余量；洗脱时间为45-46分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：由20-25％梯度变化为25-30％，流动相B：余量；洗脱时间为46-56分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：25-30％，流动相B：余量；其中，所述的流动相A为0.01-0.5％甲酸水溶液，所述的流动相B为0.01-0.5％甲酸乙腈溶液。 6.根据权利要求5所述的方法，其中所述梯度洗脱程序如下：洗脱时间为0-15分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：30％，流动相B：70％；洗脱时间为15-30分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：由30％梯度变化为23％，流动相B：余量；洗脱时间为30-45分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：23％，流动相B：77％；洗脱时间为45-46分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：由23％梯度变化为30％，流动相B：余量；洗脱时间为46-56分钟时，流动相的体积浓度：流动相A：30％，流动相B：70％。 7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述流动相A为0.1％甲酸水溶液；和/或，所述流动相B为0.1％甲酸乙腈溶液；所述的流动相A浓度的梯度变化为线性梯度变化、指数梯度变化或折线梯度变化。 8.根据权利要5所述的方法，其中所述高效液相色谱仪的流速为1.0-1.2ml/min，优选为1.0ml/min；所述高效液相色谱仪的检测波长为208-220nm，优选为210nm；所述高效液相色谱仪的柱温为25-40℃，优选为30℃。 9.根据权利要求1-8任一项所述的方法在大麻质量评价中地应用。 10.根据权利要求1-8任一项所述的方法在食品、药品、口岸或司法检测中的应用。
所属类别：	发明专利