原文传递
一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法
| 专利名称： | 一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法 |
| 摘要： | 一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法，包括，将捕获抗体和检测抗体分别修饰在金纳米颗粒CA‑AuNP和量子点DA‑QD上；将样品加入到CA‑AuNP和DA‑QD混合液中，震荡、孵育一段时间，形成CA‑AuNP‑抗原‑DA‑QD的夹心结构；取制备的溶液滴于载玻片上，将载玻片置于暗场显微镜下成像；照射载玻片一段时间，在照射过程中记录金颗粒的散射强度；夹心结构中的金颗粒与量子点发生等离子共振能量转移，导致金颗粒散射强度降低。没有形成夹心结构的CA‑AuNP散射强度与颗粒数目分布为正态分布，以该正态分布的期望值为基准值；统计低于和高于基准值的金颗粒数目，计算两者比例，以该比例定量抗原浓度。本方法为均相免疫分析，简单快捷，使用样品量少，在单颗粒水平上成像，检测限低、检测灵敏度高。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 江苏师范大学 |
| 发明人： | 盖宏伟;张玉苏;刘晓君 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-05-14T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-08-16T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910396483.4 |
| 公开号： | CN110133246A |
| 分类号： | G01N33/532(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 221000 江苏省徐州市铜山区上海路101号 |
| 主权项： | 1.一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法，其特征在于，包括以下步骤： S1：将捕获抗体和检测抗体分别修饰在金纳米颗粒CA-AuNP和量子点DA-QD上； S2：将样品加入到CA-AuNP和DA-QD混合液中，震荡、孵育一段时间，形成CA-AuNP-抗原-DA-QD的夹心结构； S3：取S2制备的溶液滴于载玻片上，将载玻片置于暗场显微镜下成像； S4：照射载玻片一段时间，在照射过程中记录金颗粒的散射强度；夹心结构中的金颗粒与量子点发生等离子共振能量转移，导致金颗粒散射强度降低；没有形成夹心结构的CA-AuNP散射强度与颗粒数目分布为正态分布，以该正态分布的期望值为基准值，统计步骤S4中低于和高于基准值的金颗粒数目，计算两者比例； S5：将步骤S4中的低于基准值的金颗粒数量与高于基准值的金颗粒数量之比与抗原浓度关联。 2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述步骤S1中的金纳米颗粒包括金纳米球、金纳米棒、金纳米星和不规则的金纳米颗粒；所述步骤S2中的孵育时间为10～100分钟；所述步骤S3具体包括：取1～5微升S2制备的溶液滴于载玻片上，将载玻片置于暗场显微镜下成像；所述步骤S4中的照射时间为2～30分钟；所述步骤S5中的关联为以步骤S4获得的比例为纵坐标，以抗原浓度的对数值为横坐标获得标准曲线或标准加入法。 3.权利要求1-2任一所述的分析方法在简单溶液中肿瘤标志物定量检测中的应用。 4.权利要求1-2任一所述的分析方法在血清肿瘤标志物定量检测中的应用。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
