详情

原文传递用于检测癌胚抗原的试剂盒和检测方法及其应用

专利名称：	用于检测癌胚抗原的试剂盒和检测方法及其应用
摘要：	本发明涉及电化学检测领域，公开了一种用于检测癌胚抗原的试剂盒和检测方法及其应用。本发明的试剂盒包括纳米金双功能探针和免疫磁珠；其中，所述纳米金双功能探针包括纳米金颗粒以及连接在该纳米金颗粒上的第二抗体和检测标记物；所述免疫磁珠包括磁珠和连接在该磁珠上的第一抗体；所述第一抗体和所述第二抗体各自独立地为抗癌胚抗原的抗体。本发明的试剂盒和检测方法具有灵敏度高、检测速度快、重复性好的优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	湖北民族大学
发明人：	齐宝平;尚冰冰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910387291.7
公开号：	CN110133252A
代理机构：	北京润平知识产权代理有限公司
代理人：	刘兵;戴香芸
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	445000 湖北省恩施土家族苗族自治州恩施市学院路39号
主权项：	1.一种用于检测癌胚抗原的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括纳米金双功能探针和免疫磁珠；其中，所述纳米金双功能探针包括纳米金颗粒以及连接在该纳米金颗粒上的第二抗体和检测标记物；所述免疫磁珠包括磁珠和连接在该磁珠上的第一抗体；所述第一抗体和所述第二抗体各自独立地为抗癌胚抗原的抗体。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述第二抗体为生物素化的抗体，所述纳米金颗粒为生物素化的纳米金颗粒，所述第二抗体和所述纳米金颗粒通过链酶亲和素相互连接；优选地，所述免疫磁珠通过EDC/NHS活化法将所述第一抗体与所述磁珠共价偶联而得；优选地，所述纳米金颗粒的平均直径为8.4-13.5nm；所述磁珠的平均直径为300-500nm。 3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，以纳米金颗粒计的所述纳米金双功能探针与以磁珠计的所述免疫磁珠的摩尔比为1：6-18；优选地，所述纳米金颗粒与所述第二抗体的摩尔比为1：3-10；优选地，所述磁珠与所述第一抗体的摩尔比为1：5-12。 4.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述检测标记物为辣根过氧化物酶；优选地，所述链酶亲和素与所述根过氧化物酶的摩尔比为1：2-5，优选为1：3-5。 5.一种癌胚抗原的检测方法，其特征在于，该方法包括将纳米金双功能探针和免疫磁珠与待测样品接触，使得所述纳米金双功能探针、所述免疫磁珠与待测样品中的癌胚抗原反应得到免疫夹心复合物，并通过纳米金双功能探针上的检测标记物检测癌胚抗原；其中，所述纳米金双功能探针包括纳米金颗粒以及连接在该纳米金颗粒上的第二抗体和检测标记物；所述免疫磁珠包括磁珠和连接在该磁珠上的第一抗体；所述第一抗体和所述第二抗体各自独立地为抗癌胚抗原的抗体。 6.根据权利要求5所述的检测方法，其中，所述第二抗体为生物素化的抗体，所述纳米金颗粒为生物素化的纳米金颗粒，所述第二抗体和所述纳米金颗粒通过链酶亲和素相互连接；优选地，所述免疫磁珠通过EDC/NHS活化法将所述第一抗体与所述磁珠共价偶联而得；优选地，所述纳米金颗粒的平均直径为8.4-13.5nm；所述磁珠的平均直径为300-500nm。 7.根据权利要求5或6所述的检测方法，其中，以纳米金颗粒计的所述纳米金双功能探针与以磁珠计的所述免疫磁珠的摩尔比为1：6-18；优选地，所述纳米金颗粒与所述第二抗体的摩尔比为1：3-10；优选地，所述磁珠与所述第一抗体的摩尔比为1：5-12。 8.根据权利要求5-7中任意一项所述的检测方法，其中，所述检测标记物为辣根过氧化物酶；优选地，所述链酶亲和素与所述根过氧化物酶的摩尔比为1：2-5，优选为1：3-5。 9.根据权利要求5-7中任意一项所述的检测方法，其中，使用差分脉冲伏安扫描测定检测标记物的量，差分脉冲伏安扫描的起始电势为0.05-0.15V，优选为0.08-0.1V；优选地，检测液中的底物H2O2的浓度为2-4mmol/L。 10.权利要求1-4中任意一项所述的试剂盒或者权利要求5-9中任意一项所述的检测方法在检测癌胚抗原中的应用。
所属类别：	发明专利