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原文传递一种二硫化钼芯片的制备方法及应用

专利名称：	一种二硫化钼芯片的制备方法及应用
摘要：	本发明涉及生物技术检测领域，具体涉及一种二硫化钼芯片的制备方法及应用。本发明所述方法利用二硫化钼结合纳米金形成二硫化钼金复合材料，在氨基化的固相载体上，氨基与纳米金之间相互作用固定二硫化钼金纳米复合材料，再共价连接核酸适配体，对带荧光的DNA进行淬灭，随着加入可卡因浓度的不同，荧光也有对应的恢复，得到可卡因检测标准曲线，实现对可卡因浓度的检测。本发明检测方法简单、成本低、灵敏度高且具有特异性，可同时进行多样本检测，所得的结果直观，容易辨别。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏大学
发明人：	高力;刘城;邓泽斌;施海峰;时海霞;夏妮;相文文;王慧星
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910358739.2
公开号：	CN110133305A
分类号：	G01N33/94(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	212013 江苏省镇江市京口区学府路301号
主权项：	1.一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将浓硫酸和过氧化氢溶液混合，加入固相载体，浸泡后超纯水清洗后晾干；（2）将步骤（1）中晾干后的固相载体放入含有2%-3%的3-氨基丙基三乙氧基硅烷与乙醇的混合液中震荡后清洗晾干，获得氨基化的固相载体；（3）取二硫化钼、纳米金与水混合反应30分钟后加入乙二醇，搅拌后离心洗脱，得到二硫化钼金复合材料，将二硫化钼金复合材料滴加在步骤（2）中制备得到的氨基化的固相载体上，室温下反应12小时，PBS缓冲液清洗去除未固定的二硫化钼金，得到固定有二硫化钼金的固相载体；（4）在步骤（3）得到的固定有二硫化钼金的固相载体上加入含有巯基修饰的核酸适配体，培育清洗后得到二硫化钼芯片。 2.根据权利要求1所述的一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的浓硫酸和过氧化氢的体积比为7:3。 3.根据权利要求1所述的一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的固相载体为载玻片或成分为二氧化硅的玻璃片。 4.根据权利要求1所述的一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述的二硫化钼、纳米金、水和乙二醇的用量关系为1g：1g：1mL:1~5 mL。 5.根据权利要求1所述的一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所用二硫化钼金复合材料的浓度为50~150μg/mL。 6.根据权利要求1所述的一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述的搅拌为90℃下搅拌5h。 7.根据权利要求1所述的一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述适配体的序列如SEQ ID NO：1所示，核酸适配体的浓度为1~20nM。 8.根据权利要求1所述的一种二硫化钼芯片的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述的培育清洗为4℃下过夜培育后PBS缓冲液缓慢清洗。 9.如权利要求1-8任一项所述方法制备的二硫化钼芯片的应用，所述应用为用于可卡因浓度的检测。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述应用为通过二硫化钼芯片测定不同可卡因浓度下的荧光强度，得到标准曲线，再根据所述标准曲线检测待测可卡因浓度。
所属类别：	发明专利