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原文传递一种基于多肽复合膜修饰电极的L-精氨酸检测方法及传感器

专利名称：	一种基于多肽复合膜修饰电极的L-精氨酸检测方法及传感器
摘要：	本发明公开了一种基于多肽复合膜修饰电极的L‑精氨酸（L‑Arg）检测方法及传感器，所述方法包括合成二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷（FC‑Peptide）、制备FC‑Peptide/AuE多肽复合膜修饰电极和L‑精氨酸检测等步骤。结果表明，FC‑Peptide/AuE多肽复合膜修饰电极对L‑Arg表现出良好的电化学响应特性。在10 mmol/L磷酸盐缓冲溶液（PBS，pH=7.4）中，该多肽复合膜修饰电极的DPV响应峰电流与L‑Arg的浓度在1.000×10‑14～1.000×10‑5 mol/L范围内存在良好的线性关系，检测限为1.000×10‑14 mol/L。该修饰电极具有良好的重现性、重复性与选择性，在生命科学与营养健康方面有潜在的应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖南;43
申请人：	长沙理工大学
发明人：	曹忠;周立;朱凯杰;朱钦;何婧琳;肖忠良;贺玉敏;冯泽猛;印遇龙
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201910605833.3
公开号：	CN110220961A
代理机构：	长沙优企知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	周栋
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	410000 湖南省长沙市天心区万家丽南路二段960号
主权项：	1.一种基于多肽复合膜修饰电极的L-精氨酸检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： (1)合成二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷；所述二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷结构式如式(I)所示： (2)制备FC-Peptide/AuE多肽复合膜修饰电极：将金电极于Piranha溶液中浸泡后清洗，然后抛光，洗净并用N2吹干；将吹干后的金电极浸入二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷浓度为30～80μmol/L的二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷溶液和三(2-羧乙基)膦浓度为10～80μmol/L的磷酸盐缓冲溶液中20～30h；再将金电极于6-巯基-1-己醇浓度为0.5～2.0mmol/L的6-巯基-1-己醇溶液中浸泡2～30min后，用PBS沿着金电极表面冲洗以除去非特异性吸附的其它物质，用N2吹干即得FC-Peptide/AuE多肽复合膜修饰电极； (3)以FC-Peptide/AuE多肽复合膜修饰电极为工作电极，以银/氯化银电极作为参比电极，以铂丝电极作为对电极，构成三电极体系；然后采用循环伏安法和示差脉冲伏安法考察不同修饰电极的电化学行为，并采用示差脉冲伏安法对不同浓度的L-精氨酸进行测试，绘制工作标准曲线，再采用标准加入法对待测样品中的L-精氨酸进行检测。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中对金电极表面进行抛光是分别用1.0μm、0.3μm和0.05μm的氧化铝粉对金电极表面进行抛光。 3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述金电极直径为3mm。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中是在10mmol/L磷酸盐缓冲溶液、2.0mmol/L[Fe(CN)6]4-/3--0.20mol/L Na2SO4溶液、含有1.0×10-5mol/L精氨酸的10mmol/L磷酸盐缓冲溶液中采用循环伏安法和示差脉冲伏安法考察不同修饰电极的电化学行为，采用示差脉冲伏安法对不同浓度的L-精氨酸进行电流响应与浓度关系测试；示差脉冲伏安法参数为：振幅0.05V，脉冲周期0.5s，抽样宽度0.02，脉冲宽度0.2s，循环伏安法参数为：采样间隔0.001V，扫速100mV/s。 5.一种基于多肽复合膜修饰电极的L-精氨酸检测传感器，特征在于，所述传感器包括作为工作电极的多肽复合膜修饰电极；所述多肽复合膜修饰电极包括金基质(5)，所述金基质(5)表面修饰有多肽复合膜层(6)，所述多肽复合膜层(6)中含有多肽分子(7)。 6.如权利要求5所述的传感器，其特征在于，所述多肽分子(7)为二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷分子。 7.如权利要求5所述的传感器，其特征在于，所述多肽复合膜层(6)中还含有6-巯基-1-己醇分子(8)。 8.如权利要求5所述的传感器，其特征在于，所述金基质(5)的厚度为1.0～5.0mm，所述多肽复合膜层(6)的厚度为2～20nm。 9.如权利要求5至8任一项所述的传感器，其特征在于，所述传感器对L-精氨酸的浓度存在良好的线性关系，检测的线性范围为1.000×10-14～1.000×10-5mol/L，检出限为1.000×10-14mol/L。 10.二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷在制备生物传感器中的应用，所述二茂铁功能化多肽二硫代环戊烷结构式如式(I)所示：
所属类别：	发明专利