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原文传递一种双抑制电致化学发光传感器及测定草甘膦的方法

专利名称：	一种双抑制电致化学发光传感器及测定草甘膦的方法
摘要：	本发明涉及农残分析测定技术领域，特别是涉及一种双抑制电致化学发光传感器以及用其测定草甘膦的方法，包括双抑制传感器制备步骤和使用该传感器测定草甘膦的操作方法等；这种双抑制传感器，利用了酶促反应和铜络合物类过氧化酶催化作用，是两种信号转换方式的结合而产生协同效应，有效提高传感器的检测灵敏度；用于草甘膦的检测，共存物质的干扰小，选择性好，灵敏度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	济南大学
发明人：	周长利;刘汉彪;陈培培;刘建辉;衣姜乐;夏方诠
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-15T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910402589.0
公开号：	CN110186910A
代理机构：	济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业)
代理人：	李茜
分类号：	G01N21/76(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	250022 山东省济南市市中区南辛庄西路336号
主权项：	1.一种双抑制电致化学发光传感器及测定草甘膦的方法，其特征在于，鲁米诺复合材料负载于双酶电极表面，并作为发光试剂和类过氧化物酶，通过草甘膦抑制酶促反应和类过氧化物酶的催化作用，用于草甘膦的检测。 2.权利要求1所述双酶电极，其特征在于，乙酰胆碱酯酶AChE和胆碱氧化酶ChOx负载于金纳米粒子-石墨烯Au-rGO修饰的玻碳电极表面。 3.权利要求1所述鲁米诺复合材料，其特征在于，鲁米诺与纳米金和L-半胱氨酸-Cu2+络合物复合形成鲁米诺-Au-Lcys-Cu2+复合材料，所述复合材料呈球状结构，平均尺寸约为70nm。 4.权利要求1所示的双抑制电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：将2.0 μL乙酰胆碱酯酶和10 μL胆碱氧化酶滴涂到Au-rGO 修饰玻碳电极Au-rGO/GCE表面，孵育过夜，得修饰电极AChE-ChOx/Au-rGO/GCE；在电极表面滴加8.0 μL 鲁米诺-Au-L-cys-Cu2+复合材料，同时以戊二醛在4℃孵化2 h进行交联，制得鲁米诺-Au-L-cys-Cu2+/AChE-ChOx/Au-rGO/GCE；上述各步骤孵化后均用pH 7.4的PBS 轻轻冲洗，除去物理吸附的材料。 5.权利要求4所述的Au-rGO/GCE，其特征在于，制备步骤如下：将玻碳电极在麂皮上依次用0.3、0.05 μm Al2O3 粉抛光成镜面，然后用超纯水冲洗掉表面的Al2O3，并依次在乙醇和超纯水中各超声10 s，室温下晾干备用；将8.0 μL的Au-rGO滴在GCE表面并在室温下晾干，得rGO-Au/GCE修饰电极。 6.权利要求1、3-4任一要求所述的鲁米诺-Au-L-cys-Cu2+复合材料，其特征在于，制备步骤如下：将1.0 mL、15 mmol/L鲁米诺和5.0 mL、0.25 mmol/L HAuCl4 混合，在室温下剧烈搅拌12 h，得鲁米诺-Au NPs溶液；（2）室温下，将100 μL、6.0 mmol/L L-Cys水溶液加入到1.0 mL 鲁米诺-Au NPs溶液中，并在4℃温育5 h；继续加入100.0 μL、6 mmol/L Cu2+溶液，并在室温下震荡5 min，得鲁米诺-Au-L-cys-Cu2+复合材料。 7.权利要求1所述的电致化学发光适配体传感器用于检测草甘膦。 8.根据权利要求7所述的检测草甘膦，其特征在于，方法如下：将不同浓度的草甘膦滴涂于鲁米诺-Au-L-cys-Cu2+/AChE-ChOx/Au-rGO/GCE表面，在37°C下孵化60 min，用pH 7.4的PBS缓冲液冲洗；在含有0.1 mol/L氯化乙酰胆碱的pH 7.4的PBS缓冲溶液中，以制备的传感器为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为辅助电极，在0.0~0.7 V电位区间内进行循环伏安扫描，记录发光强度。
所属类别：	发明专利