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原文传递 1,1′-联萘-2,2′-二胺检测小分子代谢物的MALDI-MS方法及应用

专利名称：	1,1′-联萘-2,2′-二胺检测小分子代谢物的MALDI-MS方法及应用
摘要：	1,1'‑联萘‑2,2'‑二胺检测小分子代谢物的MALDI‑MS方法及应用。所述方法包括：1)将新鲜生物组织制冰冻切片转移至导电载玻片上，进行真空抽干处理，得到组织切片；2)以1,1'‑联萘‑2,2'‑二胺为基质，将基质和溶剂配置成溶液后喷涂至步骤(1)的组织切片上，进行MALDI质谱成像分析；然后对生物组织中不同种类小分子代谢物进行靶向MALDI质谱数据提取，获得其离子强度值。本发明以1,1'‑联萘‑2,2'‑二胺为基质进行生物组织MALDI‑MS分析，不仅背景干扰低，而且显著提高了小分子代谢物的检测灵敏度，同时，还能够实现生物组织中多种代谢物的同时高覆盖分析。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东省分析测试中心
发明人：	孙成龙;刘伟;王晓
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910530059.4
公开号：	CN110146586A
代理机构：	济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：	郑平
分类号：	G01N27/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	250014 山东省济南市历下区科院路19号
主权项：	1.1,1'-联萘-2,2'-二胺作为基质在基质辅助激光解吸电离质谱检测中的应用。 2.1,1'-联萘-2,2'-二胺作为基质在生物组织中小分子代谢物的基质辅助激光解吸电离质谱检测中的应用。 3.如权利里要求2所述的应用，其特征在于，所述生物组织织包含动物组织和/或植物组织。 4.如权利里要求2或3所述的应用，其特征在于，所述小分子代谢物包括：胆碱类(优选为胆碱、甘油磷酸胆碱)、肉碱类(优选为肉碱、C2:0肉碱)、多胺类(优选为精胺、亚精胺)、有机酸类(优选为牛磺酸、琥珀酸)、氨基酸类(优选为精氨酸、谷氨酸)、核苷(优选为肌苷、尿苷)、核苷酸(优选为腺苷酸、肌苷酸)、含氮碱基(优选为黄嘌呤、次黄嘌呤)、脂肪酸(优选为亚油酸、花生四烯酸)、胆固醇(优选为硫酸胆固醇)、黄酮(优选为黄芩素、汉黄芩素)、丹参酮(优选为丹参酮I、丹参酮IIA)、酚酸(优选为咖啡酸、阿魏酸)、多糖(优选为植物二糖、植物三糖)、多肽(优选为谷胱甘肽)、磷脂(优选为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺)中的任意一种或多种。 5.一种以1,1'-联萘-2,2'-二胺为基质检测小分子代谢物的MALDI-MS方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)将新鲜生物组织制冰冻切片转移至导电载玻片上，进行真空抽干处理，得到组织切片； (2)以1,1'-联萘-2,2'-二胺为基质，将基质和溶剂配置成溶液后置于步骤(1)的组织切片上，进行MALDI质谱成像分析；然后对生物组织中不同种类小分子代谢物进行靶向MALDI质谱数据提取，获得其离子强度值，即得。 6.如权利要求5所述的以1,1'-联萘-2,2'-二胺为基质检测小分子代谢物的MALDI-MS方法，其特征在于，步骤(1)中，所述新鲜生物组织包含动物组织和植物组织。 7.如权利要求6所述的以1,1'-联萘-2,2'-二胺为基质检测小分子代谢物的MALDI-MS方法，其特征在于，所述动物组织切片的厚度为10-18微米，更优选为12毫米；优选地，所述植物组织切片的厚度为6-12微米，更优选为8毫米。 8.如权利要求5所述的以1,1'-联萘-2,2'-二胺为基质检测小分子代谢物的MALDI-MS方法，其特征在于，步骤(1)中，所述导电载玻片为ITO-氧化铟锡导电载玻片，对角线电阻值为20-300Ω，优选为40Ω。 9.如权利要求5所述的以1,1'-联萘-2,2'-二胺为基质检测小分子代谢物的MALDI-MS方法，其特征在于，步骤(2)中，所述溶剂为含三氟乙酸的乙腈-水混合溶液；优选地，所述三氟乙酸的质量浓度为0.1-0.3％；优选地，所述乙腈-水中乙腈和水的体积比为7：3；优选地，步骤(2)中，所述溶液中基质的浓度为0.2-1mg/mL；优选为0.5mg/mL。 10.如权利要求5-9任一项所述的以1,1'-联萘-2,2'-二胺为基质检测小分子代谢物的MALDI-MS方法，其特征在于，步骤(2)中，所述将溶液涂至组织切片上的方法为：采用喷涂的方法，喷涂速率为0.05-0.15mL/分钟，喷涂温度为40-90℃，喷嘴轨道间距为2-5mm，循环喷涂6-12次；优选地，所述喷涂速率为0.10mL/分钟，喷涂温度为80℃，喷嘴轨道间距为3mm，循环喷涂10次。
所属类别：	发明专利