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一种基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法
| 专利名称： | 一种基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种基于流式细胞术的HLA‑B27快速检测方法，步骤包括：将25μL外周血样本与15μL HLA‑B27‑FIT/CD3‑PE抗体共孵育，加入溶血素，静置后离心去上清，加入流式鞘液，离心去上清，洗涤后加入多聚甲醛溶液混匀后上流式细胞仪进行检测，检测时将所要收集的细胞设定为2000个。本发明通过集约式富集的方法，并对流式软件的检测程序作进一步优化，降低试剂用量，大大减少了标本用量与检测时间，掌握了HLA‑B27快速检测技术，建立了快速化、集约化的HLA‑B27检测平台。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 北京中同蓝博临床检验所有限公司 |
| 发明人： | 张火兵;王师;童能胜 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-05-20T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-08-20T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910417790.6 |
| 公开号： | CN110146691A |
| 代理机构： | 北京众达德权知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 刘杰 |
| 分类号： | G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 100160 北京市丰台区南四环西路128号院1号楼1层122至131号、2层217至224号 |
| 主权项： | 1.一种基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，步骤包括：将25-30μL外周血样本与15-18μL HLA-B27-FIT/CD3-PE抗体共孵育，加入溶血素，静置后离心去上清，加入鞘液1.5-2.5mL，离心去上清，洗涤后加入多聚甲醛溶液混匀后上流式细胞仪进行检测，检测时将所要收集的细胞设定为2000-2500个。 2.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，其特征在于：所述洗涤为采用鞘液洗涤一次。 3.如权利要求1或2所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，其特征在于：所述上机检测过程中，前期采用中速收集细胞，后期采用高速收集细胞。 4.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，其特征在于：所述上机检测的检测时长为20～30s。 5.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，其特征在于：所述共孵育条件为：室温下避光静置孵育13-17min。 6.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，其特征在于：所述溶血素为1×HLA-B27BD FACS溶血素，溶血素加入量为1.5-2.5mL，加入溶血素后静置8-12min。 7.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，其特征在于：所述离心条件为：300g离心4-6min。 8.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法，其特征在于：所述多聚甲醛溶液质量浓度为1％，多聚甲醛溶液添加量为280-320μL。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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