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原文传递一种同时测血清中尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮含量的方法

专利名称：	一种同时测血清中尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮含量的方法
摘要：	本发明公开了一种同时测血清中尼古丁、3‑(吡咯烷‑2‑基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮含量的方法。该方法简单快速、检测灵敏度高、针对性强、适用范围广，经验证该方法对四种目标物的测定均具有较高的回收、良好的线性关系、较低的定量限，可一次同时检测多种目标物，快捷高效。该发明的前处理方法、液相方法以及部分液质方法同样适用于血清中与上述四种成分性质相近的其他目标物分析，适用性较强。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	温州科技职业学院
发明人：	张维一;何如意;高晴盈;陈静静;郑明华;徐静;徐仁爱;梁秀美;张井;谢拾冰;张辉;林定鹏
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910482380.X
公开号：	CN110146615A
代理机构：	温州名创知识产权代理有限公司
代理人：	陈加利
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	325000 浙江省温州市瓯海区东方南路38号温州市国家大学科技孵化器
主权项：	1.一种同时测血清中尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮含量的方法，其特征在于包括以下步骤： (1)使用经前处理的血清空白基质以及一系列不同溶度不同目标物配置的标准溶液，利用液相串联质谱检测，绘制标准曲线，所述的目标物为尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮或睾酮； (2)对待检测血清样品进行前处理，然后利用液相串联质谱检测； (3)根据标准曲线计算同时得出血清样品中的尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮的含量；所述的步骤(1)和步骤(2)的前处理为：将待处理的血清，加入预冷的乙腈，然后涡旋和超声后冷冻离心分离，移取全部上清，再次加入预冷的乙腈，然后涡旋后冷冻离心，移取全部上清，过0.22μm滤膜，得到待检样品；所述的步骤(1)和步骤(2)中的液相串联质谱中液相方法包括有：流动相方法和固定相方法；所述的流动相方法基于梯度洗脱，其操作条件为基于时间的各参数为：时间：0.00、0.20、1.20、2.20、2.21、4.00，单位为分钟；流速：0.50、0.50、0.50、0.50、0.50、0.50，单位为ml/min；乙腈与含0.1％甲酸的水的流动性比例为：5:95、5:95、90:10、90:10、5:95、5:95；所述固定相方法为选用1.8μm、2.1x100mm的ACQUITY UPLC HSS T3柱，柱温箱温度37℃；分别对应离子对：3-(吡咯烷-2-基)吡啶、尼古丁、吡啶吡咯酮、睾酮的质谱方法的操作条具体为：定量离子对：149.06->132.09、163.16->130.09、177.14->80.04、289.30->109.07；锥孔电压：30V、30V、10V、6V；碰撞能量：12V、18V、21V、24V；定性离子对：149.06->130.07、163.16->132.10、177.14->146.07、289.30->97.08；锥孔电压：30V、30V、10V、6V；碰撞能量：16V、14V、17V、22V。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中的不同溶度为：浓度为0.0001ng/mL、0.0002ng/mL、0.0005ng/mL、0.001ng/mL、0.002ng/mL、0.005ng/mL、0.01ng/mL、0.02ng/mL、0.05ng/mL、0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：该方法定量限较低，3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮定量限低至0.1ng/mL，尼古丁定量限低至1.0ng/mL。
所属类别：	发明专利