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原文传递生化样品原位处理装置及磷酸化蛋白的质谱成像方法

专利名称：	生化样品原位处理装置及磷酸化蛋白的质谱成像方法
摘要：	本发明公开一种生化样品原位处理装置及磷酸化蛋白的质谱成像方法，涉及分析化学技术领域。所述生化样品原位处理装置包括：生化处理槽、被配置在生化处理槽内的载玻片托，以及被配置在载玻片托内的载玻片和双层磁铁，所述双层磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片；所述磷酸化蛋白质谱成像方法利用四氧化三铁悬浮液吸附固定磷酸化肽段，随后即可进行质谱检测。本发明利用磁场技术和磁性材料对生化样品进行原位处理，并应用于磷酸化蛋白的质谱成像中。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国科学院动物研究所
发明人：	刘科辉;娄新徽;霍雨萌;侯国丽
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910356110.4
公开号：	CN110146353A
代理机构：	北京正理专利代理有限公司
代理人：	赵晓丹
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	100020 北京市朝阳区北辰西路1号院5号
主权项：	1.一种生化样品原位处理装置，其特征在于，包括：生化处理槽、被配置在生化处理槽内的载玻片托，以及被配置在载玻片托内的载玻片和双层磁铁；所述载玻片托包括用于固定载玻片的第一本体部，以及结合固定在所述第一本体部底部的用于固定所述双层磁铁的第二本体部；所述第二本体部包括有一端开口的容纳腔，所述双层磁铁位于所述容纳腔内；所述载玻片位于所述双层磁铁在第一本体部上的投影所限定的区域内，所述双层磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片。 2.根据权利要求1所述的生化样品原位处理装置，其特征在于，所述第一本体部包括用于放置载玻片的卡槽以及用于固定载玻片的第一卡子，所述载玻片通过第一卡子被水平固定在所述卡槽内；所述第二本体部还包括有用于固定所述双层磁铁的第二卡子，所述双层磁铁通过第二卡子被水平固定在所述容纳腔内。 3.根据权利要求1所述的生化样品原位处理装置，其特征在于，所述生化样品原位处理装置还包括用于提拉载玻片托的提绳。 4.根据权利要求1所述的生化样品原位处理装置，其特征在于，所述载玻片的厚度为0-2mm，且不包括0mm；载玻片与双层磁铁之间的距离为0-2mm。 5.根据权利要求1所述的生化样品原位处理装置，其特征在于，所述载玻片与所述双层磁铁之间设有用于支撑所述载玻片的隔离板，所述隔离板的厚度为0-2mm。 6.根据权利要求1所述的生化样品原位处理装置，其特征在于，所述第一本体部和所述第二本体部为一体结构，或者所述第一本体部和所述第二本体部为结合固定在一起的两个独立结构。 7.根据权利要求1所述的生化样品原位处理装置，其特征在于，所述生化处理槽和载玻片托的材料为聚苯乙烯、透明塑料或玻璃。 8.一种磷酸化蛋白的质谱成像方法，其特征在于，包括：将蛋白酶切后的生物组织冰冻切片放置在如权利要求1-7任一项所述的生化样品原位处理装置的载玻片上，在所述生物组织冰冻切片的表面喷洒四氧化三铁悬浮液并孵育15min；用50％的乙腈溶液清洗生物组织冰冻切片表面的非磷酸化肽段，未被原位固定的非磷酸化肽段被清除，真空抽干后进行质谱检测。 9.根据权利要求8所述的质谱成像方法，其特征在于，生物组织切片用冰冻切片的方法制备成冰冻切片，喷洒胰酶溶液并孵育2h，真空干燥，得到蛋白酶切后的生物组织冰冻切片。 10.根据权利要求9所述的质谱成像方法，其特征在于，所述四氧化三铁悬浮液的浓度为0.01-100ug/ul，喷洒体积为5-250ul。
所属类别：	发明专利