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原文传递一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件及其构建方法

专利名称：	一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件及其构建方法
摘要：	本发明公开了一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，包括核酸适配体分子信标探针和通过DNA固相合成技术嵌入至所述核酸适配体分子信标探针环状区域的8‑17型DNA酶的活性中心序列。本发明还公开了该核酸器件的构建方法，该方法先通过将核酸适配体和分子信标串联制备核酸适配体分子信标探针，再将8‑17型DNA酶的活性中心序列通过DNA固相合成技术嵌入至制备的核酸适配体分子信标探针的环状区域制备核酸器件。本发明的核酸器件的构建方法操作简单，通过特异性识别肿瘤细胞中处于高水平表达的mRNA，通过DNA酶活性中心切割肿瘤mRNA，降低mRNA的含量，抑制肿瘤mRNA的表达，实现对肿瘤mRNA的检测和调控，实现肿瘤疾病的早期诊断与基因治疗。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖南;43
申请人：	长沙医学院
发明人：	李海刚;王胜峰;周文虎
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910386615.5
公开号：	CN110161244A
代理机构：	长沙市标致专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	徐邵华
分类号：	G01N33/574(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	410219 湖南省长沙市望城区雷锋大道1501号长沙医学院护理学院
主权项：	1.一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸器件包括核酸适配体分子信标探针和通过DNA固相合成技术嵌入至所述核酸适配体分子信标探针环状区域的8-17型DNA酶的活性中心序列，所述核酸器件的序列为5'-TTGGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGGTTTT(Int6-FAM)CTGGCTCCCAGCTCCGAGCCGGTCGAATCCAG CTCCTTGGCCAGA-BHQ-1-3'。 2.如权利要求1所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸适配体分子信标探针包括核酸适配体和通过TTT序列与所述核酸适配体串联的分子信标，在所述分子信标的5'和3'端分别连接荧光基团和淬灭基团。 3.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述荧光基团为6-FAM，所述淬灭基团为BHQ-1。 4.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸适配体分子信标探针的序列为5'-TTGGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGGTTTT (Int6 -FAM)CTGGCTCCCAGCTCC AGCTCCTTGG CCAGA- BHQ- 1-3'。 5.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸适配体的序列如SEQ ID NO.1所示。 6.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述分子信标的序列如SEQ ID NO.2所示。 7.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述8-17型DNA酶的活性中心序列如SEQ ID NO.3所示。 8.如权利要求1所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸器件的靶向肿瘤mRNA为survivin mRNA。 9.一种如权利要求1-8任一项所述用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件的构建方法，其特征在于：包括以下步骤： 1）制备核酸适配体分子信标探针：先将SEQ ID NO.2所示的分子信标序列的5'端修饰荧光基团6-FAM，在其3'端修饰淬灭基团BHQ-1，再将SEQ ID NO.1所示的核酸适配体序列通过DNA固相合成技术串联至修饰有荧光基团和淬灭基团的分子信标上，并在核酸适配体的3'端和分子信标上的荧光基团之间嵌入TTT序列，得到核酸适配体分子信标探针； 2）制备核酸器件：将8-17型DNA酶的活性中心序列通过DNA固相合成技术嵌入至步骤1）制备的核酸适配体分子信标探针的环状区域中，所述环状区域的序列为TCCCAGCTCCAGCTCCTTG，所述活性中心序列嵌入至环状区域序列中第7个碱基C和第8个碱基T之间，得到核酸器件。 10.如权利要求1-9任一项所述用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件在用于肿瘤诊疗的试剂盒中的应用。
所属类别：	发明专利