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原文传递尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法

专利名称：	尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法
摘要：	本发明公开了一种尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法，涉及尿液中甲卡西酮的贮存和检测技术领域，尿液中甲卡西酮的检测方法包括以下步骤：(1)、样品制备；(2)、仪器检测条件；(3)、质谱条件。该尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法，通过HPLC‑MS/MS法采用多反应监测模式(MRM)建立了尿液中甲卡西酮的定性定量方法，同时进行了长期稳定性考察，得出了甲卡西酮阳性尿液在不同环境中长期存储的降解规律，为确定甲卡西酮阳性尿液样本的安全稳定的存放方式和存放期限提供科学依据，同时所选初始浓度可覆盖所有阳性尿液样本的浓度范围，适用范围广。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	公安部禁毒情报技术中心
发明人：	吴健美;樊颖锋;陈捷;燕谨;乔宏伟
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910572947.2
公开号：	CN110161167A
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	100072 北京市丰台区珠江御景27-26
主权项：	1.一种尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法，其特征在于：尿液中甲卡西酮的检测方法包括以下步骤： (1)、仪器检测条件：高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS)：岛津LCMS-8050，配有SIL-30AC自动采样器和LC-30AD检测系统进行分析，色谱柱为Waters Acquity UPLC @ BEH·HILLIC(2.1×100mm，1.7μm)，流动相A为水相缓冲液，流动相B为有机相缓冲液，梯度洗脱程序为(洗脱程序见图1)：0～5min，流动相A由0％变为20％，6min，由20％变为0％，平衡1min，总运行时间为6min，流动相B由100％变为80％，6min，由80％变为100％，平衡1min，总运行时间为6min，柱温：35℃，进样量：1ul，流速为：0.4ml/min； (2)、质谱条件：采集模式：正离子多反应监测(MRM)模式，(MRM检测参数见图2)；离子源温度：400℃，接口温度：300℃，DL温度：250℃，喷雾器氮气流量：2.0L/min，干燥气体流量：10.0L/min，加热气体流量：10L/min，碰撞电压：270kpa。 2.根据权利要求1所述的一种尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法，其特征在于：所述水相缓冲液：量取2mL甲酸和0.63g甲酸铵，加入1000mL超纯水溶解。 3.根据权利要求1所述的一种尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法，其特征在于：所述有机相缓冲液：量取2mL甲酸和0.63g甲酸铵，加入100mL超纯水溶解，加入900mL乙腈。 4.根据权利要求1所述的一种尿液中甲卡西酮的贮存和检测方法，其特征在于：尿液中甲卡西酮的适宜储存条件探究方法： (1)、样品制备：取100μl尿液加入100μl内标液(甲卡西酮-d3)和800μl乙腈涡旋混合，经0.22μm滤膜过滤至样品瓶； (2)、方法验证：前期对尿液中甲卡西酮定量方法进行了验证试验，(验证结果见表3)，回收率在88.4％至96.5％之间，基质效应在101.5％至109％之间，定量限(LOD)均为5ng/mL，每项试验均取五份尿液样本进行平行分析，测定结果显示，低浓度和高浓度的尿液样品的精密度RSD值均低于6.5％； (3)、初始浓度的确定：由于毒品滥用剂量、滥用时间和个人体质差异，尿液中毒品的含量差别很大，为了使监测结果更具代表性，在确定尿样中毒品初始浓度时，我们对采集的约100份尿液样本检测结果进行了统计分析(尿液样本中甲卡西酮浓度分布范围见图4)，根据实验结果，尿液中三种毒品浓度范围基本可以以0.1、1、10μg/mL为节点平均划分为四个部分(尿液样本中甲卡西酮浓度分布范围见图4)，最终确定此三个浓度为稳定性实验的初始浓度； (4)、尿液的制备和取样：取空白尿液1升(PH值6.90-7.10)加入适量甲卡西酮标准溶液，制得浓度为0.1、1和10μg/mL的阳性尿液，分装于聚丙烯离心管中，每管1mL，分别存储于冷冻(-20℃)、冷藏(4℃)、室温(20℃)条件，其中冷冻存储的样品分为两部分，一部分为长期冷冻保存，另一部分为反复冻融保存，存储期限为6个月和12次冻结-解冻循环； (5)、样本检测：样品制备好后立即进行仪器检测，检测结果作为初始浓度C0，分别存储于上述四种环境条件下，前3天内，每天进行一次取样检测，第1个月每周进行一次取样检测，第2个月到第6个月，每月进行1次抽样检测，每次取样，不同存储条件均取3份平行样本检测，计算浓度平均值，被分析过的聚丙烯管直接废弃； (6)、数据分析：监测结果中，所取3份平行检测样本的RSD值均需小于12％，且实验采用t检验对检测结果进行统计评估，如果两组比较数据P＜0.05，说明有明显变化，否则无显著变化(尿液中甲卡西酮的监测含量与初始浓度的百分比及使用t检验统计数据之间的差异情况见图5)。
所属类别：	发明专利