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原文传递评价3-氯-1,2-丙二醇及其酯短期暴露的巯基尿酸加合物检测方法及应用

专利名称：	评价3-氯-1,2-丙二醇及其酯短期暴露的巯基尿酸加合物检测方法及应用
摘要：	本发明公开了一种评价膳食3‑MCPD短期体内暴露的巯基尿酸加合物同步检测方法，包括以下步骤：将啮齿类动物尿液/高级哺乳动物尿液进行预处理，作为进样；色设定谱条件进行梯度洗脱；设定质谱条件进行质谱定量检测；采用标准曲线法对检测结果进行定量分析。本发明实现了DHPMA这一巯基尿酸加合物的检测，通过直接检测尿液代谢物就能实现3‑MCPD这一食品加工污染物的内暴露分析。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江大学
发明人：	章宇;贾伟;陈信宇
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-06T00:00:00+0800
申请号：	CN201910468468.6
公开号：	CN110208406A
代理机构：	杭州中成专利事务所有限公司
代理人：	金祺
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
主权项：	1.评价膳食3-MCPD短期体内暴露的巯基尿酸加合物同步检测方法，其特征是包括以下步骤： (一)样品预处理：将啮齿类动物尿液/高级哺乳动物尿液进行预处理，作为进样； (二)色谱条件：色谱柱种类及规格为ACQUTITYBEH AMIDE、ACQUTITYBEH Shield RP或ACQUTITYHSS T3；进样体积为1～10μL；流速：0.2mL/min；柱温：40℃；流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为0～1％(体积％)甲酸水，流动相B为0.1％甲酸乙腈，梯度洗脱程序如下表1：表1 (三)质谱条件：仪器：三重四级杆串联质谱仪；质谱定量方法：多重反应监测(MRM)；离子源：电喷雾(ESI)负离子扫描方式；鞘气温度：375℃；鞘气流速8L/min；喷嘴电压：500V；雾化器压力：45psi；干燥气温度：300℃；干燥器流速：5L/min；载气：氮气；碰撞气：氮气；锥孔电压和碰撞电压见表2；表2、DHPMA的质谱参数注：a为定量离子通道，b为定性离子通道四、数据计算：采用标准曲线法对检测结果进行定量分析。 2.根据权利要求1所述的评价膳食3-MCPD短期体内暴露的巯基尿酸加合物同步检测方法，其特征是所述步骤(一)中： 1、啮齿类动物尿液预处理方法：在5～50μL的啮齿类动物尿液中加入同位素内标D5-DHPMA0.1μg，用稀释液稀释定容至1mL，涡旋混匀；经0.22μm微孔滤膜过滤后进样分析；所述稀释液为0.1～0.5％(体积％)甲酸水溶液； 2、高级哺乳动物尿液预处理方法：高级哺乳动物尿液，取1mL，加入混合同位素内标D5-DHPMA0.1μg，再依次加入10μL甲酸和和2mL的甲酸铵(50mmol/L,pH2.5)，或者依次加入50μL盐酸溶液(4mol/L)和2mL的甲酸铵(50mmol/L,pH2.5)；涡旋混匀后离心；将上清液至固相萃取柱，待流干后用1～4mL0.1％甲酸水溶液作为淋洗液进行淋洗，去除杂质并弃去淋洗液；最后用1～4mL1％的甲酸甲醇进行洗脱，收集洗脱液；洗脱液吹干，用初始流动相溶液定容至1mL，涡旋溶解，经0.22μm微孔滤膜过滤后进样分析；所述初始流动相溶液由流动相A：流动相B＝90:10～98:2的体积比组成；流动相A为0～1％(体积％)甲酸水，流动相B为0.1％甲酸乙腈。 3.根据权利要求2所述的评价膳食3-MCPD短期体内暴露的巯基尿酸加合物同步检测方法，其特征是：所述啮齿类动物尿液预处理方法中，在5～50μL的动物尿液中加入10μL同位素内标液，再用稀释液稀释定容至1mL，所述同位素内标液是由浓度为10μg/mL的同位素内标以及作为溶剂的稀释液组成；备注说明：动物尿液预处理方法，稀释倍数为20～200倍；若稀释倍数为20，那么应取50μL鼠尿，再加入10μL浓度为10μg/mL的混合同位素内标，用稀释液稀释至1mL；若稀释倍数为200，那么应取5μL鼠尿，再加入10μL浓度为10μg/mL的混合同位素内标，用稀释液稀释至1mL。 4.根据权利要求2所述的评价膳食3-MCPD短期体内暴露的巯基尿酸加合物同步检测方法，其特征是高级哺乳动物尿液预处理方法中：取100μL人体尿液，加入10μL同位素内标液，依次加入10μL甲酸或50μL盐酸溶液(4mol/L)和2mL的甲酸铵(50mmol/L,pH2.5)，所述同位素内标液是由浓度为10μg/mL的同位素内标以及作为溶剂的稀释液组成；所述固相萃取柱种类和规格为Isolute ENV+SPE cartridge或Isolute ENV+SPEcartridge。 5.根据权利要求1～4任一所述的评价膳食3-MCPD短期体内暴露的巯基尿酸加合物同步检测方法，其特征是梯度洗脱程序为：
所属类别：	发明专利