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原文传递一种荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用

专利名称：	一种荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用
摘要：	本发明提供了一种荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，所述荧光碳点在追踪不同细胞系下的活细胞、固定细胞、凋亡的细胞中溶酶体的实时成像和长时间成像中的应用，荧光碳点的制备方法为：将无水柠檬酸加入到水中溶解，溶解后加入N，N‑二甲基苯胺，混合液移入微波管中，微波加热反应，反应液经超滤，柱层析分离，得到荧光碳点。本发明碳点合成十分简单，便于操作；能实现碳点在溶酶体的实时成像和长时间成像，实现碳点在活细胞、固定的细胞和凋亡的细胞内的溶酶体成像，本发明可实现碳点在不同细胞系下的活细胞内的溶酶体成像，本发明可实现碳点在氯喹刺激下活细胞内的溶酶体成像。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河南;41
申请人：	郑州大学
发明人：	李朝辉
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-14T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910513753.5
公开号：	CN110174387A
代理机构：	郑州优盾知识产权代理有限公司
代理人：	王红培
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	450001 河南省郑州市高新区科学大道100号
主权项：	1.一种荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，其特征在于，所述荧光碳点在追踪不同细胞系下的活细胞、固定细胞、凋亡的细胞中溶酶体的实时成像和长时间成像中的应用，荧光碳点的制备方法为：将无水柠檬酸加入到水中溶解，溶解后加入N，N-二甲基苯胺，混合液移入微波管中，微波加热反应，反应液经超滤，柱层析分离，得到荧光碳点。 2.根据权利要求1所述的荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，其特征在于，用碳点母液孵育不同细胞系下的细胞，并用共聚焦显微镜，以激发波长为405 nm光源激发，观察细胞成像图。 3.根据权利要求1所述的荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，其特征在于，用碳点母液孵育固定的细胞、凋亡下的细胞，并用共聚焦显微镜，以激发波长为405 nm光源激发，观察细胞成像图。 4.根据权利要求1所述的荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，其特征在于，用碳点母液孵育细胞，再加入氯喹刺激溶酶体的移动，并用共聚焦显微镜，以激发波长为405 nm光源激发，观察细胞成像图。 5.根据权利要求1-4任一项所述的荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，其特征在于，包括以下步骤：（1）称取荧光碳点，用超纯水溶解，准确配制10 mg/mL的碳点储存液；（2）向比色皿中加入1990 µL的PBS缓冲溶液后，加入6 µL 10 mg/mL的碳点储存液，以405 nm进行激发，探针具有很强的荧光发射；（3）通过共聚焦显微镜对孵育好荧光碳点的活细胞、固定的细胞和凋亡下的细胞进行荧光成像；（4）通过共聚焦显微镜对孵育好荧光碳点的不同细胞系下的活细胞进行荧光成像；（5）通过共聚焦显微镜对孵育不同时间的荧光碳点的活细胞进行荧光成像；（6）通过共聚焦显微镜对氯喹刺激下碳点孵育的活细胞进行荧光成像。 6.根据权利要求1所述的荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，其特征在于，所述N，N-二甲基苯胺和无水柠檬酸的物质的量之比为1：（1-3）；N，N-二甲基苯胺和水的体积比为1:（10-30）。 7.根据权利要求1所述的荧光碳点在天然靶向溶酶体中的应用，其特征在于，所述微波加热的温度为160 ℃，反应时间为6-14 h；所述超滤分子量为3000 Da。
所属类别：	发明专利