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原文传递一种测定肺表面活性物质蛋白的方法及其应用

专利名称：	一种测定肺表面活性物质蛋白的方法及其应用
摘要：	本公开涉及一种测定肺表面活性物质蛋白的方法及其应用，具体涉及一种能够不经分离制备或抗体抗原等免疫分析技术，直接测定哺乳动物的肺表面活性物质制剂(或肺功能研究样品)及其起始物料、制备过程中间体等样品中肺表面活性物质相关蛋白SP‑A、SP‑B、SP‑C、SP‑D的电泳技术和方法，使用离子表面活性剂(SDS)和强还原剂(二硫苏糖醇)经高温、高速离心等独特方法处理样品，选择合适的预制胶，经电泳分离，获得清晰条带，各条带经鉴定，确定分别为SP‑A、SP‑B、SP‑C、SP‑D。本发明无需将肺表面活性物质相关蛋白与磷脂分开，试验周期短，流程简单可控，避免使用高污染试剂，避免蛋白成分丢失，结果更为直观、可靠，提高了测定结果的准确性和精确度。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	华润双鹤药业股份有限公司
发明人：	胡金艳;寇同欣;杨溦;营亚萍
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910499423.5
公开号：	CN110174456A
代理机构：	中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
代理人：	张小勇
分类号：	G01N27/447(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	100102 北京市朝阳区望京利泽东二路1号
主权项：	1.检测哺乳动物肺表面活性物质样品中SP-A、SP-B、SP-C、SP-D的方法，所述方法包括使用离子表面活性剂和还原剂处理样品的步骤，其中向样品中加入质量体积百分比为2％～10％、优选2％～5％的离子表面活性剂。 2.根据权利要求1所述的方法，其中所述离子表面活性剂包括阴离子表面活性剂。 3.根据权利要求2所述的方法，其中所述阴离子表面活性剂包括十二烷基硫酸钠SDS。 4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述还原剂包括选自巯基乙醇和二硫苏糖醇的还原剂。 5.根据前述任一项权利要求所述的方法，其中处理样品的步骤还包括加入非离子表面活性剂。 6.根据权利要求5所述的方法，其中所述非离子表面活性剂选自吐温和泊洛沙姆，其中所述吐温优选包括吐温80。 7.根据前述任一项权利要求所述的方法，其中处理样品的步骤还包括以转速10,000rpm～20000rpm、优选15000～18000rpm，或离心力25,000g～50000g、优选30000～45000g进行离心。 8.根据前述任一项权利要求所述的方法，还包括直接采用电泳测定样品中的四种肺表面活性物质相关蛋白中的任一种。 9.根据权利要求7所述的方法，其中所述电泳包括聚丙烯酰胺凝胶电泳。 10.根据权利要求9所述的方法，其中电泳所用聚丙烯酰胺凝胶的浓度不低于16％。 11.离子表面活性剂在制备用于检测哺乳动物肺表面活性物质样品中SP-A、SP-B、SP-C、SP-D的试剂盒中的用途，其中所述检测包括使用离子表面活性剂和还原剂处理样品的步骤，其中所述离子表面活性剂的工作浓度任选质量体积百分比为2％～10％的浓度；任选地，所述离子表面活性剂包括阴离子表面活性剂；任选地，所述阴离子表面活性剂包括十二烷基硫酸钠SDS。 12.试剂盒，其包含离子表面活性剂，所述离子表面活性剂用于检测哺乳动物肺表面活性物质样品中SP-A、SP-B、SP-C、SP-D，其中所述离子表面活性剂的工作浓度任选质量体积百分比为2％～10％的浓度；任选地，所述离子表面活性剂包括阴离子表面活性剂；任选地，所述阴离子表面活性剂包括十二烷基硫酸钠SDS。
所属类别：	发明专利