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原文传递一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法

专利名称：	一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法
摘要：	一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法，包括：(1)供试品溶液，紫花杜鹃药材粉碎，称定，置提取器中，加石油醚热回流提取，弃石油醚，加甲醇，加热回流，补甲醇，滤过；(2)对照品溶液：取芸香苷、槲皮苷、金丝桃苷、槲皮素、山柰素、齐敦果酸对照品，以甲醇为溶剂配制混合对照品溶液；(3)测定：分别取对照品溶液与供试品溶液注入液相色谱仪，记录105分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得紫花杜鹃药材的指纹图谱。本发明的积极效果是：本发明建立了紫花杜鹃药材HPLC特征指纹图谱共有模式，标定了16个共有峰，能有效的表征其质量，克服了原质量控制方法的单一性和片面性，具有较高的应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	吉林;22
申请人：	长春中医药大学
发明人：	赫玉芳;夏昉;段明华;张彪;刘京硕;于露;林贺;孙佳明
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201910649775.4
公开号：	CN110274976A
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	130117 吉林省长春市净月国家高新技术产业开发区博硕路1035号
主权项：	1.一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)供试品溶液的制备：取紫花杜鹃药材，粉碎，过筛，取0.2～1.0g，精密称定，置索氏提取器中，加沸点为30～60℃的石油醚50～200mL，加热回流0.5～3小时，弃去石油醚液，药渣挥去石油醚，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20～100mL，密塞，称定重量，加热回流30～90分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液； (2)对照品溶液的制备：分别精密称取芸香苷、槲皮苷、金丝桃苷、槲皮素、山柰素、齐敦果酸对照品适量，精密称定，以甲醇为溶剂，配制成质量浓度分别为0.01、0.08、0.01、0.02、0.02、0.2mg/mL的混合对照品溶液，过0.45μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液； (3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～20μl，注入高效液相色谱仪，记录105分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得紫花杜鹃药材的指纹图谱。 2.根据权利要求1所述的一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱，流速0.5～1.5ml/min，柱温28～42℃，检测波长210～350nm；理论塔板数按槲皮苷峰计算应不低于3500。 3.根据权利要求1所述的一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)供试品溶液的制备：取紫花杜鹃药材，粉碎，过60目筛，取0.5g，精密称定，置索氏提取器中，加沸点为30～60℃的石油醚100mL，加热回流1小时，弃去石油醚液，药渣挥去石油醚，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液； (2)对照品溶液的制备：分别精密称取芸香苷、槲皮苷、金丝桃苷、槲皮素、山柰素、齐敦果酸对照品适量，精密称定，置于同一25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密吸取1mL置于同一10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度分别为0.0102、0.0806、0.01048、0.02008、0.02016、0.2002mg/mL的混合对照品溶液，过0.45μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液； (3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录105分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得紫花杜鹃药材的指纹图谱。 4.根据权利要求3所述的一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法，其特征在于：所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱为：ACE 5C18-AR 250×4.60mm；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长280nm，理论塔板数按槲皮苷峰计算应不低于3500。 5.根据权利要求2或4所述的一种紫花杜鹃药材HPLC指纹图谱构建方法，其特征在于：梯度洗脱过程中，流动相A、B的比例变化为：0～32min，10％～19％A；32～50min，19％～30％A；50～60min，30％～40％A；60～70min，40％～50％A；70～80min，50％～60％A；80～90min，60％～70％A；90～100min，70％～90％A；100～105min，90％～10％A；105～110min，10％A。
所属类别：	发明专利