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原文传递印度紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法

专利名称：	印度紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法
摘要：	本发明公开了一种印度紫檀HPLC标准指纹图谱，其具有7个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，7个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.141，0.160，0.318，0.373，0.521，0.777，1.000，RSD％<0.3％。本发明还公开了该图谱的构建方法和应用。本发明建立的印度紫檀HPLC标准指纹图谱，通过对比特征峰的有无，可有效的进行印度紫檀真伪鉴别。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心
发明人：	魏建华;刘晓莹;魏霜;吴剑光;刘碧琳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910243630.4
公开号：	CN110018263A
代理机构：	上海旭诚知识产权代理有限公司
代理人：	郑立
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	515031 广东省汕头市大华路11号主楼
主权项：	1.一种印度紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，具有7个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，7个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.141，0.160，0.318，0.373，0.521，0.777，1.000，RSD％<0.3％。 2.如权利要求1所述的印度紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，7个所述特征峰的相对峰面积分别为：0.2799，0.0361，0.0184，0.0418，0.0176，0.0191，1.000，RSD<2.0。 3.一种如权利要求1所述的印度紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、供试品溶液的制备：称取印度紫檀心材部分木屑，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液；步骤二、HPLC检测：将所述步骤一得到的供试品溶液进行HPLC检测，色谱条件为：Agilent Eclipse XDB-C18，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm；以水为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0～20min，流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,流动相B的体积百分含量为23％，流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,流动相B的体积百分含量30％，流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，流动相B的体积百分含量38％，流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，流动相B的体积百分含量49％，流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，流动相B的体积百分含量8％，流动相A的体积百分含量为92％；检测波长为290nm；柱温30℃；流速1.0mL/min；得到HPLC检测结果。 4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述步骤一具体为：称取印度紫檀心材部分木屑0.2g，置于50mL离心管中，加入5mL甲醇、5mL高纯水，震摇5min，超声提取5min，滤纸过滤，再以0.2μm的微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液。 5.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，还包括步骤三、分析比较多批来源不同的印度紫檀的HPLC检测结果，得到由其共有特征峰构成的所述印度紫檀HPLC标准指纹图谱。 6.如权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述步骤三具体为：将所述多批来源不同的印度紫檀的HPLC检测结果导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”，选取时间窗宽度为0.2min，以中位数生成对照谱图，经过多点校正后自动匹配，生成印度紫檀指纹图谱共有模式，并计算所述多批来源不同的印度紫檀的HPLC检测结果与该印度紫檀指纹图谱共有模式的相似度，使得所述相似度在0.800以上。 7.如权利要求5所述的构建方法，其特征在于，还包括步骤四、所述印度紫檀HPLC标准指纹图谱的精密度试验、重现性试验及稳定性试验。 8.如权利要求1所述的印度紫檀HPLC标准指纹图谱在鉴别印度紫檀真伪方面的应用。 9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，疑似印度紫檀的样品的HPLC指纹图谱与所述印度紫檀HPLC标准指纹图谱对比，根据其共有特征峰的有无，进行印度紫檀真伪鉴别。 10.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述疑似印度紫檀的样品的HPLC指纹图谱的获得除色谱柱外，采用了如权利要求3或4所述的方法；当所述疑似印度紫檀的样品的HPLC指纹图谱采用Agilent Eclipse XDB-C18，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm时，将所述疑似印度紫檀的样品的HPLC指纹图谱通过相似度分析软件与所述印度紫檀HPLC标准指纹图谱以7个共有峰特征峰11.950min、13.581min、26.932min、31.614min、44.104min、65.848min、84.739min，进行多点校正，匹配的方式选择Mark峰匹配；对于相似度≥0.8，且其中峰面积最大的所述特征峰为参照峰，分别计算与共有特征峰对应的相对保留时间0.141，0.160，0.318，0.373，0.521，0.777，1.000，RSD％<0.3％。鉴定结果为印度紫檀，否则疑似印度紫檀依然存疑。
所属类别：	发明专利